Langsung ke isi
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107
Tisu
Endoserviks
Penyakit
Adenokarsinoma
Lokasi metastasis
Lokasi tumor primer (endoserviks)

Dokumen

HK-2xZFN-mEGFP-Nup107

Cell line · Nomor produk 300676

Baris sel HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 merupakan varian hasil rekayasa genetika dari baris sel Hela Kyoto, yang berasal dari sel kanker serviks manusia. Baris sel ini...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Stok menipis
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 adalah varian yang direkayasa secara genetik dari garis sel Hela Kyoto, yang berasal dari sel kanker serviks manusia. Jalur sel ini telah dimodifikasi menggunakan teknologi Zinc Finger Nuclease (ZFN) untuk mengintegrasikan monomer Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP) ke dalam gen Nup107, sebuah komponen penting dari kompleks pori nuklir (NPC). Nup107 memainkan peran kunci dalam transpor nukleositoplasma, yang penting untuk homeostasis seluler dan regulasi gen.

Integrasi mEGFP memungkinkan visualisasi dan pelacakan Nup107, memfasilitasi studi tentang dinamika dan fungsi NPC. Penandaan fluoresen ini membantu memahami distribusi spasial dan temporal Nup107 dan interaksinya dengan nukleoporin dan faktor transpor lainnya. Garis sel HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 sangat berharga untuk meneliti mekanisme transpor seluler dan patofisiologi penyakit.

Garis sel ini menyediakan model yang kuat untuk mempelajari cara kerja NPC yang rumit dan implikasi kesehatan dan penyakitnya, menggabungkan stabilitas genetik dan asal manusia dari sel Hela Kyoto dengan rekayasa genetika canggih.

Tisu
Endoserviks
Penyakit
Adenokarsinoma
Lokasi metastasis
Lokasi tumor primer (endoserviks)
Aplikasi
Biologi kompleks pori nuklear (NPC); pencitraan kompleks Nup107/Y; transportasi nukleositoplasmik; visualisasi sel hidup menggunakan mEGFP; dinamika NPC; validasi pengeditan genom dengan ZFN

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the Nup107 locus enabling nuclear pore complex imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Sel mirip epitel dengan bentuk batu mosaik
Jenis sel
Sel epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 (Nomor katalog Cytion 300676)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_VL12
Nasabah penyimpanan
Laboratorium Ellenberg (Ellenberg Lab) (EMBL)

05Ekspresi dan kerentanan

Produk
EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein) Nup107

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
30 tahun
Etnis
Afrika-Amerika