.jpg)
- Tecido
- Endocérvix
- Doença
- Adenocarcinoma
- Local da metástase
- Localização do tumor primário (endocérvix)
Documentos
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107
Cell line · Número do produto 300676
A linha celular HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 é uma variante geneticamente modificada da linha celular Hela Kyoto, derivada de células de cancro do colo do útero humano. Esta linha celular...
Personalização / Recomendações
- HK-2xZFN-mEGFP-Nup107Cell line€800.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 é uma variante geneticamente modificada da linha celular Hela Kyoto, derivada de células de cancro do colo do útero humano. Esta linha celular foi modificada utilizando a tecnologia Zinc Finger Nuclease (ZFN) para integrar a proteína monomérica Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP) no gene Nup107, um componente crucial do complexo do poro nuclear (NPC). O Nup107 desempenha um papel fundamental no transporte nucleocitoplasmático, essencial para a homeostase celular e a regulação dos genes.
A integração do mEGFP permite a visualização e o rastreio do Nup107, facilitando os estudos sobre a dinâmica e as funções do NPC. Esta marcação fluorescente ajuda a compreender a distribuição espacial e temporal da Nup107 e as suas interações com outras nucleoporinas e factores de transporte. A linha celular HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 é de valor inestimável para a investigação dos mecanismos de transporte celular e da fisiopatologia das doenças.
Esta linha celular fornece um modelo robusto para o estudo do funcionamento intrincado do NPC e das suas implicações para a saúde e a doença, combinando a estabilidade genética e a origem humana das células Hela Kyoto com engenharia genética avançada.
- Tecido
- Endocérvix
- Doença
- Adenocarcinoma
- Local da metástase
- Localização do tumor primário (endocérvix)
- Aplicações
- Biologia do complexo de poros nucleares (NPC); imagiologia do complexo Nup107/Y; transporte nucleocitoplasmático; visualização de células vivas com mEGFP; dinâmica do NPC; validação da edição do genoma com ZFN
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Feminino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the Nup107 locus enabling nuclear pore complex imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Células de tipo epitelial com forma de pedra em mosaico
- Tipo de célula
- Células epiteliais
04Identificadores
- Referência
- HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 (número de catálogo 300676 da Cytion)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL12
- Depositante
- O Laboratório Ellenberg (EMBL)
05Expressão e suscetibilidade
- Produtos
- EGFP (Proteína fluorescente verde melhorada) Nup107
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 30 anos
- Etnia
- Afro-americano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- Aplicam-se os acordos com terceiros
- Sim