Mine otse sisu juurde
RH-35
Kude
Maksa
Haigus
Roti hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
H4II, H-35tc2, Reuber-H-35 hepatoma tissue culture 2, Reuber H-35 tc2, Reuber H35 tc2, H-35 Reuber tc2, H35 Reuber tc2, RH-35 tc2, RH35 tc2, H-35 tc2, H35 tc2

Dokumendid

RH-35

Cell line · Toote number 305210

The H4-II-E (also referred to as RH-35) cell line is a derivative of the Reuber H-35 rat hepatoma. This cell line originated from a liver tumor induced in...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

H4-II-E (ka RH-35) rakuliin on Reuber H-35 rotihepatoomi derivaat. See rakuliin pärineb maksakasvajast, mis tekkis isasel ACI-rotil kokkupuutel keemilise kantserogeeni N-2-fluorünüüldiatsetamiidiga. H4-II-E rakud moodustavad ACI-rottidele siirdamisel kiiresti kasvavaid kasvajaid, mille histoloogilised tunnused on iseloomulikud halvasti diferentseerunud hepatoomidele. Need rakud on eriti tundlikud arüülsüsivesinike hüdroksülaasi (AHH) aktiivsuse indutseerimise suhtes, mis teeb neist tugeva süsteemi ensümaatiliste reaktsioonide uurimiseks polütsüklilistele aromaatsetele süsivesinikele ja dioksiinitaolistele ühenditele.

H4-II-E rakud on ka mudeliks rakkude reaktsioonide uurimiseks kantserogeenidele ja kiirgusele, kuna nad on kloonogeensed ja võimaldavad uurida rakkude pikaajalist ellujäämist pärast ravi. Nende kasutamine laieneb ensüümide indutseerimise mehhanismide, ksenobiootiliste ainete metabolismi ja maksaspetsiifilise toksikoloogia uurimisele. Need omadused muudavad H4-II-E hindamatuks vahendiks vähiuuringutes ja toksikoloogilises sõeluuringus.

Kude
Maksa
Haigus
Roti hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
  • H4II
  • H-35tc2
  • Reuber-H-35 hepatoma tissue culture 2
  • Reuber H-35 tc2
  • Reuber H35 tc2
  • H-35 Reuber tc2
  • H35 Reuber tc2
  • RH-35 tc2
  • RH35 tc2
  • H-35 tc2
  • H35 tc2

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
RH-35 (Cytioni katalooginumber 305210)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_4623

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
AxC