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RH-35
Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do rato
Sinónimos
H4II, H-35tc2, Reuber-H-35 hepatoma tissue culture 2, Reuber H-35 tc2, Reuber H35 tc2, H-35 Reuber tc2, H35 Reuber tc2, RH-35 tc2, RH35 tc2, H-35 tc2, H35 tc2

Documentos

RH-35

Cell line · Número do produto 305210

The H4-II-E (also referred to as RH-35) cell line is a derivative of the Reuber H-35 rat hepatoma. This cell line originated from a liver tumor induced in...

€430.00sem impostos nem portes de envio
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Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular H4-II-E (também designada RH-35) é um derivado do hepatoma do rato Reuber H-35. Esta linha celular teve origem num tumor hepático induzido num rato ACI macho pela exposição ao carcinogéneo químico N-2-fluorenildiacetamida. Quando transplantadas para ratos ACI, as células H4-II-E formam tumores de crescimento rápido com caraterísticas histológicas próprias de hepatomas pouco diferenciados. São particularmente sensíveis à indução da atividade da aril-hidrocarboneto hidroxilase (AHH), o que as torna um sistema robusto para o estudo das respostas enzimáticas aos hidrocarbonetos aromáticos policíclicos e aos compostos do tipo dioxina.

As células H4-II-E também servem de modelo para o estudo das respostas celulares aos carcinogéneos e à radiação, dada a sua clonogenicidade e a capacidade de avaliar a sobrevivência celular a longo prazo após o tratamento. A sua aplicação estende-se à exploração dos mecanismos de indução enzimática, do metabolismo dos xenobióticos e da toxicologia específica do fígado. Estas caraterísticas fazem do H4-II-E um instrumento inestimável na investigação do cancro e no rastreio toxicológico.

Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do rato
Sinónimos
  • H4II
  • H-35tc2
  • Reuber-H-35 hepatoma tissue culture 2
  • Reuber H-35 tc2
  • Reuber H35 tc2
  • H-35 Reuber tc2
  • H35 Reuber tc2
  • RH-35 tc2
  • RH35 tc2
  • H-35 tc2
  • H35 tc2

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
RH-35 (número de catálogo da Cytion 305210)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4623

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12, com: 1,0 mM de glutamina estável, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 1,1 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820600a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
AxC