Skip to content
RH-35
Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับของหนู
Synonyms
H4II, H-35tc2, Reuber-H-35 hepatoma tissue culture 2, Reuber H-35 tc2, Reuber H35 tc2, H-35 Reuber tc2, H35 Reuber tc2, RH-35 tc2, RH35 tc2, H-35 tc2, H35 tc2

Documents

RH-35

Cell line · Product number 305210

The H4-II-E (also referred to as RH-35) cell line is a derivative of the Reuber H-35 rat hepatoma. This cell line originated from a liver tumor induced in...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ H4-II-E (หรือที่เรียกว่า RH-35) เป็นอนุพันธ์ของเซลล์ไลน์มะเร็งตับหนู Reuber H-35 ซึ่งมีต้นกำเนิดจากเนื้องอกในตับที่เกิดในหนูทดลองเพศผู้สายพันธุ์ ACI ที่ได้รับสารก่อมะเร็งทางเคมี N-2-fluorenyldiacetamideเมื่อปลูกถ่ายเซลล์ H4-II-E ลงในหนูแรท ACI เซลล์จะก่อตัวเป็นเนื้องอกที่เติบโตอย่างรวดเร็วและมีลักษณะทางจุลพยาธิวิทยาที่เป็นลักษณะเฉพาะของมะเร็งตับที่มีการแยกตัวต่ำ เซลล์เหล่านี้มีความไวต่อการกระตุ้นการทำงานของเอนไซม์ aryl hydrocarbon hydroxylase (AHH) เป็นพิเศษ ทำให้เป็นระบบที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาการตอบสนองของเอนไซม์ต่อสารไฮโดรคาร์บอนหลายวงและสารคล้ายไดออกซิน

เซลล์ H4-II-E ยังทำหน้าที่เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาการตอบสนองของเซลล์ต่อสารก่อมะเร็งและรังสี เนื่องจากความสามารถในการสร้างโคลนและการทดสอบการอยู่รอดของเซลล์ในระยะยาวหลังการรักษา การประยุกต์ใช้ของเซลล์เหล่านี้ยังครอบคลุมถึงการสำรวจกลไกการเหนี่ยวนำเอนไซม์ การเผาผลาญสารแปลกปลอม และพิษวิทยาเฉพาะตับ คุณสมบัติเหล่านี้ทำให้ H4-II-E เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าอย่างยิ่งในการวิจัยมะเร็งและการคัดกรองทางพิษวิทยา

Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับของหนู
Synonyms
  • H4II
  • H-35tc2
  • Reuber-H-35 hepatoma tissue culture 2
  • Reuber H-35 tc2
  • Reuber H35 tc2
  • H-35 Reuber tc2
  • H35 Reuber tc2
  • RH-35 tc2
  • RH35 tc2
  • H-35 tc2
  • H35 tc2

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
RH-35 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305210)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_4623

05Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM สเตเบิลกลูตามีน, w: 1.0 mM โซเดียมไพรูเวต, w: 1.1 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
เอ็กซ์ซี