Preskoči na vsebino
RH-35
Tkivo
Jetra
Bolezen
Podganji hepatocelularni karcinom
Sinonimi
H4II, H-35tc2, Reuber-H-35 hepatoma tissue culture 2, Reuber H-35 tc2, Reuber H35 tc2, H-35 Reuber tc2, H35 Reuber tc2, RH-35 tc2, RH35 tc2, H-35 tc2, H35 tc2

Dokumenti

RH-35

Cell line · Številka izdelka 305210

The H4-II-E (also referred to as RH-35) cell line is a derivative of the Reuber H-35 rat hepatoma. This cell line originated from a liver tumor induced in...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija H4-II-E (imenovana tudi RH-35) je derivat Reuberjevega hepatoma H-35. Ta celična linija izvira iz jetrnega tumorja, ki je nastal pri samcu podgane ACI zaradi izpostavljenosti kemičnemu kancerogenu N-2-fluorenildiacetamidu. Ob presaditvi v podgane ACI tvorijo celice H4-II-E hitro rastoče tumorje s histološkimi značilnostmi slabo diferenciranih hepatomov. Posebej občutljive so na indukcijo aktivnosti aril ogljikovodikove hidroksilaze (AHH), zaradi česar so zanesljiv sistem za preučevanje encimskih odzivov na policiklične aromatske ogljikovodike in dioksinu podobne spojine.

Celice H4-II-E služijo tudi kot model za preučevanje celičnih odzivov na rakotvorne snovi in sevanje, saj so klonogene in omogočajo preverjanje dolgoročnega preživetja celic po obdelavi. Njihova uporaba se razširja na raziskovanje mehanizmov indukcije encimov, presnove ksenobiotikov in toksikologije, specifične za jetra. Zaradi teh lastnosti so H4-II-E neprecenljivo orodje pri raziskavah raka in toksikološkem presejanju.

Tkivo
Jetra
Bolezen
Podganji hepatocelularni karcinom
Sinonimi
  • H4II
  • H-35tc2
  • Reuber-H-35 hepatoma tissue culture 2
  • Reuber H-35 tc2
  • Reuber H35 tc2
  • H-35 Reuber tc2
  • H35 Reuber tc2
  • RH-35 tc2
  • RH35 tc2
  • H-35 tc2
  • H35 tc2

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
RH-35 (kataloška številka Cytion 305210)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4623

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnega glutamina, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 1,1 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820600a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
AxC