Mine otse sisu juurde
RTE-2
Kude
Keel
Sünonüümid
RTE2, RTE 2, Rat Tongue Epithelial line 2

Dokumendid

RTE-2

Cell line · Toote number 500327

RTE-2 is a rat tracheal epithelial cell line originally derived from normal tracheal epithelium and subsequently immortalized to enable continuous in vitr...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

RTE-2 on rottide trahheaalepiteeli rakuliin, mis on algselt saadud normaalse trahheaalepiteeli rakudest ja seejärel immortaliseeritud, et võimaldada pidevat in vitro paljunemist. Rakud näitavad epiteeli morfoloogiat, mida iseloomustab polügonaalne, munakivilaadne kasvumuster, kui neid kasvatatakse konfluentsini. RTE-2 rakud säilitavad hingamisteede epiteelirakkude peamised struktuurilised ja funktsionaalsed omadused, sealhulgas tihedate rakuliste ühenduste moodustumise ja epiteeli tsütokeratine ekspressiooni, mis teeb neist asjakohase mudeli hingamisteede epiteeli bioloogia uurimiseks.

Funktsionaalselt on RTE-2 rakke laialdaselt kasutatud hingamisteede epiteeli diferentseerumise mehhanismide, limaskesta barjääri terviklikkuse ja keskkonnastimulitele reageerimise uurimiseks. Nad näitavad võimet polariseeruda sobivates kultiveerimistingimustes ja võivad ekspresseerida epiteelibarjääri moodustumisega seotud liitekohtade valke. Lisaks reageerivad RTE-2 rakud põletikulistele vahendajatele ja oksüdatiivsele stressile, pakkudes kontrollitud in vitro platvormi hingamisteede põletiku ja epiteelikahjustustega seotud signaaliteede uurimiseks.

Tänu oma stabiilsetele kasvunäitajatele ja säilinud epiteeli fenotüübile kasutatakse RTE-2 rakke sageli hingamisteede toksikoloogia, peremees-patogeeni interaktsioonide ja hingamisteede ümberkujundamise uuringutes. Nagu närilistelt saadud hingamisteede epiteeli mudel, pakub RTE-2 reprodutseeritavat süsteemi mehhanistlike uuringute jaoks, mis täiendavad in vivo kopsu-uuringuid.

Kude
Keel
Sünonüümid
  • RTE2
  • RTE 2
  • Rat Tongue Epithelial line 2

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Keratinotsüüdid
Tuumorigeenne
Ei

04Tunnused

Viide
RTE-2 (Cytioni katalooginumber 500327)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_5889

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Sprague-Dawley