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RTE-2
Tessuto
Lingua
Sinonimi
RTE2, RTE 2, Rat Tongue Epithelial line 2

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RTE-2

Cell line · Codice prodotto 500327

RTE-2 è una linea cellulare epiteliale tracheale di ratto originariamente derivata dall'epitelio tracheale normale e successivamente immortalizzata per consentire la coltura continua in vitro...

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01Informazioni generali

Descrizione

RTE-2 è una linea cellulare epiteliale tracheale di ratto originariamente derivata dall'epitelio tracheale normale e successivamente immortalizzata per consentire la propagazione continua in vitro. Le cellule presentano una morfologia epiteliale caratterizzata da modelli di crescita poligonali, simili a ciottoli, quando coltivate fino alla confluenza. Le cellule RTE-2 conservano le proprietà strutturali e funzionali chiave delle cellule epiteliali delle vie aeree, tra cui la formazione di giunzioni intercellulari strette e l'espressione di citocheratine epiteliali, rendendole un modello rilevante per la biologia epiteliale respiratoria.

Dal punto di vista funzionale, le cellule RTE-2 sono state ampiamente utilizzate per studiare i meccanismi di differenziazione epiteliale delle vie aeree, l'integrità della barriera mucosa e le risposte agli stimoli ambientali. Dimostrano la capacità di polarizzarsi in condizioni di coltura appropriate e possono esprimere proteine giunzionali associate alla formazione della barriera epiteliale. Inoltre, le cellule RTE-2 rispondono ai mediatori infiammatori e allo stress ossidativo, fornendo una piattaforma in vitro controllata per studiare le vie di segnalazione coinvolte nell'infiammazione delle vie aeree e nella lesione epiteliale.

Grazie alle loro caratteristiche di crescita stabile e al fenotipo epiteliale preservato, le cellule RTE-2 sono spesso impiegate negli studi di tossicologia respiratoria, interazioni ospite-patogeno e rimodellamento delle vie aeree. Come modello epiteliale delle vie aeree derivato dai roditori, RTE-2 offre un sistema riproducibile per indagini meccanicistiche che integrano la ricerca polmonare in vivo.

Tessuto
Lingua
Sinonimi
  • RTE2
  • RTE 2
  • Rat Tongue Epithelial line 2

02Classificazione

Organismo
Ratto
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cheratinocita
Tumorigenico
No

04Identificatori

Riferimento bibliografico
RTE-2 (numero di catalogo Cytion 500327)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5889

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
Sprague-Dawley