Pāriet uz saturu
RTE-2
Audums
Valoda
Sinonīmi
RTE2, RTE 2, Rat Tongue Epithelial line 2

Dokumenti

RTE-2

Cell line · Preces numurs 500327

RTE-2 ir žurku trahejas epitēlija šūnu līnija, kas sākotnēji iegūta no normāla trahejas epitēlija un vēlāk imortalizēta, lai nodrošinātu nepārtrauktu in vitro...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

RTE-2 ir žurku trahejas epitēlija šūnu līnija, kas sākotnēji iegūta no normāla trahejas epitēlija un pēc tam imortalizēta, lai nodrošinātu nepārtrauktu in vitro pavairošanu. Šūnas uzrāda epitēlija morfoloģiju, kam raksturīgi daudzstūraini, bruģakmens veida augšanas modeļi, kad tās kultivē līdz konfluencei. RTE-2 šūnas saglabā galvenās elpceļu epitēlija šūnu strukturālās un funkcionālās īpašības, tostarp ciešu starpšūnu savienojumu veidošanos un epitēlija citokeratīnu ekspresiju, padarot tās par atbilstošu modeli elpošanas epitēlija bioloģijai.

Funkcionāli RTE-2 šūnas ir plaši izmantotas, lai pētītu elpceļu epitēlija diferenciācijas mehānismus, gļotādas barjeras integritāti un reakcijas uz vides stimuliem. Tās demonstrē spēju polarizēties atbilstošos kultivēšanas apstākļos un var ekspresēt savienojumu proteīnus, kas saistīti ar epitēlija barjeras veidošanos. Turklāt RTE-2 šūnas reaģē uz iekaisuma mediatoriem un oksidatīvo stresu, nodrošinot kontrolētu in vitro platformu, lai pētītu signālceļus, kas iesaistīti elpceļu iekaisumā un epitēlija bojājumos.

Pateicoties stabilām augšanas īpašībām un saglabātam epitēlija fenotipam, RTE-2 šūnas bieži izmanto elpošanas toksikoloģijas, saimnieka un patogēna mijiedarbības un elpceļu pārveidošanās pētījumos. Kā no grauzējiem iegūts elpceļu epitēlija modelis, RTE-2 piedāvā reproducējamu sistēmu mehānisko pētījumu veikšanai, kas papildina in vivo plaušu pētījumus.

Audums
Valoda
Sinonīmi
  • RTE2
  • RTE 2
  • Rat Tongue Epithelial line 2

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Keratinocīti
Tumorogēns
Nē

04Identifikatori

Atsauce
RTE-2 (Cytion kataloga numurs 500327)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_5889

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Sprauga-Dolija