Mine otse sisu juurde
TCCSUP
Kude
Uriinipõie
Haigus
Põie kartsinoom
Sünonüümid
TCCSuP, TCC-SUP, TCC Sup

Dokumendid

TCCSUP

Cell line · Toote number 305073

The TCCSUP cell line was established from a Grade IV transitional cell carcinoma (TCC). The cell line was derived from a highly anaplastic carcinoma with ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

TCCSUP rakuliin loodi IV astme üleminekurakkude kartsinoomist (TCC). Rakuliin on saadud väga anaplastilisest kartsinoomist, millel on agressiivse pahaloomulisuse tunnused, sealhulgas kiire proliferatsioon ja halb diferentseerumine. Tsütogeneetiline analüüs näitas ebanormaalset karüotüüpi, millel puudus selge modaalarv, ning kogu selle in vitro läbimise ajal täheldati selgeid markerkromosoomi. Morfoloogiliselt on TCCSUP rakkudel epiteelilaadsed ja fibroblastilaadsed tunnused, mis on kooskõlas TCC agressiivsete kasvajate heterogeensusega.

In vitro on TCCSUP rakud monokihilises kultuuris jõuliselt kasvanud. Seda rakuliini on laialdaselt kasutatud vähiuuringutes, eelkõige põievähi bioloogia ja ravivastuse uuringutes. Eelkõige säilitavad TCCSUP rakud kasvajaga seotud antigeene, mis teeb neist väärtusliku mudeli immunoloogilisteks uuringuteks ja antigeenidele suunatud ravimeetodite väljatöötamiseks.

Täiendav molekulaarne iseloomustus on rõhutanud selle kasulikkust ravimite kõrge läbilaskevõimega skriiningus ja geneetilistes uuringutes. TCCSUP rakke on kaasatud laiaulatuslikesse proteoomi- ja genoomianalüüsidesse, sealhulgas pöördfaasiliste valkude massiiviuuringutesse, mis paljastavad muutusi signaaliradades, nagu PI3K/AKT ja MAPK. Need leiud on kooskõlas rakuliini tumorigeensete omadustega ja selle tähtsusega mudeli puhul, mis aitab mõista põievähi progresseerumise molekulaarseid aluseid.

Kude
Uriinipõie
Haigus
Põie kartsinoom
Sünonüümid
  • TCCSuP
  • TCC-SUP
  • TCC Sup

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Kahekordistumisaeg
30 kuni 40 tundi

04Tunnused

Viide
TCCSUP (Cytioni katalooginumber 305073)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1738

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
67 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa