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TCCSUP
Tessuto
Vescica urinaria
Malattia
Carcinoma della vescica
Sinonimi
TCCSuP, TCC-SUP, TCC Sup

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TCCSUP

Cell line · Codice prodotto 305073

The TCCSUP cell line was established from a Grade IV transitional cell carcinoma (TCC). The cell line was derived from a highly anaplastic carcinoma with ...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare TCCSUP è stata creata da un carcinoma a cellule transizionali (TCC) di grado IV. La linea cellulare è derivata da un carcinoma altamente anaplastico con caratteristiche di malignità aggressiva, tra cui rapida proliferazione e scarsa differenziazione. L'analisi citogenetica ha rivelato un cariotipo anormale con la mancanza di un numero modale chiaro e sono stati osservati cromosomi marcatori distinti durante i passaggi in vitro. Morfologicamente, le cellule TCCSUP mostrano caratteristiche simili a quelle epiteliali e fibroblastiche, coerenti con l'eterogeneità dei tumori TCC aggressivi.

In vitro, le cellule TCCSUP mostrano una crescita robusta in colture monostrato. Questa linea cellulare è stata ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro, in particolare negli studi sulla biologia del tumore della vescica e sulla risposta terapeutica. In particolare, le cellule TCCSUP conservano gli antigeni associati al tumore, il che le rende un modello prezioso per gli studi immunologici e per lo sviluppo di terapie mirate all'antigene.

Un'ulteriore caratterizzazione molecolare ne ha evidenziato l'utilità per lo screening di farmaci ad alto rendimento e per gli studi genetici. Le cellule TCCSUP sono state incluse in analisi proteomiche e genomiche su larga scala, compresi studi di array di proteine in fase inversa, che hanno rivelato alterazioni nelle vie di segnalazione come PI3K/AKT e MAPK. Questi risultati sono in linea con le proprietà tumorigeniche della linea cellulare e la sua importanza come modello per la comprensione delle basi molecolari della progressione del cancro alla vescica.

Tessuto
Vescica urinaria
Malattia
Carcinoma della vescica
Sinonimi
  • TCCSuP
  • TCC-SUP
  • TCC Sup

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tempo di raddoppio
da 30 a 40 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
TCCSUP (numero di catalogo Cytion 305073)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1738

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
67 anni
Etnia
Europeo