Pāriet uz saturu
TCCSUP
Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
TCCSuP, TCC-SUP, TCC Sup

Dokumenti

TCCSUP

Cell line · Preces numurs 305073

The TCCSUP cell line was established from a Grade IV transitional cell carcinoma (TCC). The cell line was derived from a highly anaplastic carcinoma with ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

TCCSUP šūnu līnija tika izveidota no IV pakāpes pārejas šūnu karcinomas (TCC). Šūnu līnija tika iegūta no augsti anaplastiskas karcinomas ar agresīvas ļaundabības pazīmēm, tostarp strauju proliferāciju un vāju diferenciāciju. Citoģenētiskā analīze atklāja anormālu kariotipu, kurā nebija skaidra modālā skaita, un tās in vitro pasāžu laikā tika novērotas atšķirīgas marķieru hromosomas. Morfoloģiski TCCSUP šūnām ir epitēlijveidīgas un fibroblastveidīgas iezīmes, kas atbilst agresīvu TCC audzēju heterogenitātei.

In vitro TCCSUP šūnām ir spēcīga augšana monoslāņa kultūrās. Šī šūnu līnija ir plaši izmantota vēža pētījumos, jo īpaši urīnpūšļa vēža bioloģijas un terapeitiskās atbildes reakcijas pētījumos. TCCSUP šūnas saglabā ar audzēju saistītos antigēnus, padarot tās par vērtīgu modeli imunoloģiskiem pētījumiem un pret antigēniem vērstu terapiju izstrādei.

Turpmāka molekulārā raksturošana ir atklājusi to lietderību augstas veiktspējas zāļu skrīninga un ģenētiskajos pētījumos. TCCSUP šūnas ir iekļautas plaša mēroga proteomikas un genomikas analīzēs, tostarp apgrieztās fāzes proteīnu masīvu pētījumos, atklājot izmaiņas tādos signalizācijas ceļos kā PI3K/AKT un MAPK. Šie atklājumi saskan ar šūnu līnijas tumorigenajām īpašībām un tās nozīmi kā modelim, lai izprastu urīnpūšļa vēža progresēšanas molekulāros pamatus.

Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
  • TCCSuP
  • TCC-SUP
  • TCC Sup

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
30 līdz 40 stundas

04Identifikatori

Atsauce
TCCSUP (Cytion kataloga numurs 305073)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1738

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
67 gadi
Etniskā piederība
Eiropas