Siirry sisältöön
J82
Kudos
Virtsarakko
Sairaus
Virtsarakon syöpä
Synonyymit
J-82, J 82, J82COT, J82 COT

Asiakirjat

J82

Cell line · Tuotenumero 305055

The J82 cell line is derived from a human bladder transitional cell carcinoma, offering a robust in vitro model for studying urothelial cancer. These cell...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

J82-solulinja on peräisin ihmisen virtsarakon siirtymäsolusyövästä, ja se tarjoaa vankan in vitro -mallin uroteelisyövän tutkimiseen. Näillä soluilla on epiteelimorfologia ja ne ovat tarttuvia viljelyssä, joten ne soveltuvat monenlaisiin kokeellisiin sovelluksiin, kuten syöpäbiologiseen tutkimukseen, lääkeseulontaan ja molekyylianalyyseihin. J82-solujen tiedetään ilmentävän virtsarakon karsinoomalle tyypillisiä merkkiaineita, kuten sytokeratiineja, jotka ovat arvokkaita virtsarakon syövän etenemiseen liittyvien molekyylireittien ymmärtämisessä ja mahdollisten hoitokohteiden tunnistamisessa.

J82-solulinja on erityisen hyödyllinen tutkimuksissa, joissa keskitytään lääkeresistenssin mekanismeihin, etäpesäkkeisiin ja geneettisten mutaatioiden rooliin virtsarakon syövässä. Tutkijat ovat käyttäneet tätä solulinjaa kemoterapeuttisten aineiden vaikutusten tutkimiseen ja sellaisten uusien yhdisteiden tunnistamiseen, jotka voivat estää syöpäsolujen kasvua. Lisäksi J82-soluja käytetään usein geeniekspressiotutkimuksissa, joissa tutkitaan onkogeenien ja kasvainsuppressorigeenien säätelyä virtsarakon syövän yhteydessä. Kuten kaikkia syöpäsolulinjoja, myös J82-solulinjaa on käsiteltävä tiukoissa laboratorio-olosuhteissa ja varmistettava, että sen käyttö rajoittuu tutkimussovelluksiin eikä mihinkään terapeuttisiin tai in vivo -tarkoituksiin.

Kudos
Virtsarakko
Sairaus
Virtsarakon syöpä
Synonyymit
  • J-82
  • J 82
  • J82COT
  • J82 COT

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä

04Tunnisteet

Lähdeviite
J82 (Cytionin tuotenumero 305055)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0359

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
HLA A2, Aw32, B5, B12, Cw5, veriryhmä A, HLA A2, Aw32, B5, B12, Cw5, veriryhmä A

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
58 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen