Pāriet uz saturu
J82
Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
J-82, J 82, J82COT, J82 COT

Dokumenti

J82

Cell line · Preces numurs 305055

The J82 cell line is derived from a human bladder transitional cell carcinoma, offering a robust in vitro model for studying urothelial cancer. These cell...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

J82 šūnu līnija ir atvasināta no cilvēka urīnpūšļa pārejas šūnu karcinomas, kas piedāvā stabilu in vitro modeli urīnpūšļa vēža izpētei. Šīm šūnām piemīt epitēlija morfoloģija, un tās ir adherentas kultūrā, tāpēc tās ir piemērotas dažādiem eksperimentāliem lietojumiem, tostarp vēža bioloģijas pētījumiem, zāļu skrīningam un molekulārai analīzei. Ir zināms, ka J82 šūnas ekspresē urīnpūšļa karcinomai raksturīgus marķierus, tostarp citokeratīnus, kas ir vērtīgi, lai izprastu urīnpūšļa vēža progresēšanā iesaistītos molekulāros ceļus un noteiktu potenciālos terapeitiskos mērķus.

J82 šūnu līnija ir īpaši noderīga pētījumiem, kuros galvenā uzmanība pievērsta rezistences pret zālēm mehānismiem, metastāzēm un ģenētisko mutāciju nozīmei urīnpūšļa vēža gadījumā. Pētnieki ir izmantojuši šo šūnu līniju, lai izpētītu ķīmijterapeitisko līdzekļu iedarbību un identificētu jaunus savienojumus, kas var kavēt vēža šūnu augšanu. Turklāt J82 šūnas bieži izmanto gēnu ekspresijas pētījumos, lai izpētītu onkogēnu un audzēja supresoru gēnu regulāciju urīnpūšļa vēža kontekstā. Tāpat kā ar visām vēža šūnu līnijām, arī ar J82 ir jārīkojas stingros laboratorijas apstākļos, nodrošinot, ka to izmanto tikai pētniecībā, nevis jebkādiem terapeitiskiem vai in vivo mērķiem.

Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
  • J-82
  • J 82
  • J82COT
  • J82 COT

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
J82 (Cytion kataloga numurs 305055)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0359

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HLA A2, Aw32, B5, B12, Cw5, A asinsgrupa

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
58 gadi
Etniskā piederība
Eiropas