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J82
Tessuto
Vescica urinaria
Malattia
Carcinoma della vescica
Sinonimi
J-82, J 82, J82COT, J82 COT

Documenti

J82

Cell line · Codice prodotto 305055

The J82 cell line is derived from a human bladder transitional cell carcinoma, offering a robust in vitro model for studying urothelial cancer. These cell...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare J82 deriva da un carcinoma a cellule transizionali della vescica umana e offre un solido modello in vitro per lo studio del cancro uroteliale. Queste cellule presentano una morfologia epiteliale e sono aderenti in coltura, il che le rende adatte a una varietà di applicazioni sperimentali, tra cui la ricerca sulla biologia del cancro, lo screening dei farmaci e l'analisi molecolare. Le cellule J82 esprimono marcatori caratteristici del carcinoma vescicale, tra cui le citocheratine, che sono preziose per comprendere le vie molecolari coinvolte nella progressione del cancro alla vescica e per identificare potenziali bersagli terapeutici.

La linea cellulare J82 è particolarmente utile per studi incentrati sui meccanismi di resistenza ai farmaci, sulle metastasi e sul ruolo delle mutazioni genetiche nel cancro della vescica. I ricercatori hanno utilizzato questa linea cellulare per esplorare gli effetti degli agenti chemioterapici e per identificare nuovi composti che possono inibire la crescita delle cellule tumorali. Inoltre, le cellule J82 sono spesso utilizzate in studi di espressione genica per indagare la regolazione degli oncogeni e dei geni soppressori del tumore nel contesto del cancro della vescica. Come tutte le linee cellulari tumorali, J82 deve essere trattata in condizioni di laboratorio rigorose, assicurando che il suo uso sia limitato alle applicazioni di ricerca e non a scopi terapeutici o in vivo.

Tessuto
Vescica urinaria
Malattia
Carcinoma della vescica
Sinonimi
  • J-82
  • J 82
  • J82COT
  • J82 COT

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
J82 (numero di catalogo Cytion 305055)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0359

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
HLA A2, Aw32, B5, B12, Cw5, gruppo sanguigno A

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
58 anni
Etnia
Europeo