Siirry sisältöön
NUGC-3
Kudos
Vatsa
Sairaus
Mahalaukun adenokarsinooma
Metastaasikohde
Brachialis-lihas
Synonyymit
NUGC3, NU-GC-3, Nagoya University-Gastric Cancer-3

Asiakirjat

NUGC-3

Cell line · Tuotenumero 305503

NUGC-3 is a human gastric carcinoma cell line derived from the primary tumor of an patient with poorly differentiated adenocarcinoma. This cell line serve...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NUGC-3 on ihmisen mahalaukun karsinoomasolulinja, joka on peräisin huonosti erilaistuneen adenokarsinooman potilaan primaarikasvaimesta. Tämä solulinja toimii tärkeänä mallina mahalaukun syövän tutkimuksessa; kyseessä on pahanlaatuinen kasvain, jolle on ominaista suuri heterogeenisyys ja huono ennuste edistyneissä vaiheissa. NUGC-3-soluja käytetään laajalti syöpäbiologian tutkimuksessa, erityisesti kasvaimen etenemisen, etäpesäkkeiden muodostumisen sekä mahasyöpään kohdistuvien uusien lääkeaineiden arvioinnin aloilla.

NUGC-3-solut ovat epiteelimorfologisia ja kiinnittyvät tavanomaisissa soluviljelyolosuhteissa. Näissä soluissa esiintyy mahalaukun adenokarsinoomaan liittyviä geneettisiä ja molekyylitason muutoksia, mukaan lukien mutaatiot keskeisissä onkogeeneissä ja tuumorisuppressorigeeneissä. Tutkijat ovat hyödyntäneet tätä solulinjaa tutkiakseen kasvaimen kasvulle kriittisiä signalointireittejä, kuten EGFR-, HER2- ja muiden reseptorityrosiinikinaasireittien säätelyhäiriöitä sekä epiteeli-mesenkymaalisia siirtymäprosesseja (EMT), joilla on merkitystä syövän invaasiossa ja etäpesäkkeiden muodostumisessa.

Tämä solulinja soveltuu myös kemoterapeuttisen resistenssin tutkimuksiin, sillä mahasyöpä kehittää usein resistenssiä tavanomaisille hoidoille. NUGC-3-soluja käytetään lääkeaineiden seulontakokeissa sytotoksisten aineiden, kohdennettujen hoitojen ja yhdistelmähoitojen tehokkuuden testaamiseen. Lisäksi ne tarjoavat vankan alustan kasvaimen ja stroman välisten vuorovaikutusten sekä kasvaimen mikroympäristön roolin tutkimiseen mahasyövän etenemisessä. Täten NUGC-3 on edelleen arvokas resurssi mahasyövän tutkimuksen ja hoitokeinojen kehittämisen edistämisessä.

Kudos
Vatsa
Sairaus
Mahalaukun adenokarsinooma
Metastaasikohde
Brachialis-lihas
Synonyymit
  • NUGC3
  • NU-GC-3
  • Nagoya University-Gastric Cancer-3

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset

04Tunnisteet

Lähdeviite
NUGC-3 (Cytionin tuotenumero 305503)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1612

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: TP53; yksinkertainen; p.Tyr220Cys (c.659A>G), määrittelemätön

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään sopiva määrä trypsiini/EDTA-liuosta viljelyastian koon mukaan (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa, kunnes solut irtoavat (5-10 minuuttia). Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täyttä elatusainetta trypsiinin/EDTA:n inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta aliquota uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
Kylvötiheys
2–4 × 10⁴/cm²
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
72 vuotta
Etnisyys
Japanilainen