Pāriet uz saturu
NUGC-3
Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Brachialis muskulis
Sinonīmi
NUGC3, NU-GC-3, Nagoya University-Gastric Cancer-3

Dokumenti

NUGC-3

Cell line · Preces numurs 305503

NUGC-3 is a human gastric carcinoma cell line derived from the primary tumor of an patient with poorly differentiated adenocarcinoma. This cell line serve...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NUGC-3 ir cilvēka kuņģa karcinomas šūnu līnija, kas iegūta no pacienta primārā audzēja, kuram bija vāji diferencēta adenokarcinoma. Šī šūnu līnija kalpo kā svarīgs modelis kuņģa vēža pētīšanai — ļaundabīgai slimībai, kam raksturīga liela heterogenitāte un slikta prognoze vēlīnās stadijās. NUGC-3 šūnas plaši izmanto vēža bioloģijas pētījumos, jo īpaši audzēja progresēšanas, metastāžu un jaunu, pret kuņģa vēzi vērstu terapeitisko līdzekļu novērtēšanas jomās.

NUGC-3 šūnas uzrāda epitēlija morfoloģiju un standarta šūnu kultivēšanas apstākļos ir adhezīvas. Šīs šūnas nes ģenētiskas un molekulāras izmaiņas, kas saistītas ar kuņģa adenokarcinomu, tostarp mutācijas galvenajos onkogēnos un audzēja supresoru gēnos. Pētnieki ir izmantojuši šo šūnu līniju, lai pētītu signālceļus, kas ir kritiski svarīgi audzēja augšanai, piemēram, EGFR, HER2 un citu receptoru tirozīnkināžu signālceļu regulācijas traucējumus, kā arī epitēlija-mezenhīma pārejas (EMT) procesu, kam ir nozīme vēža invāzijā un metastāzē.

Šī šūnu līnija ir piemērota arī pētījumiem par rezistenci pret ķīmijterapiju, jo kuņģa vēzim bieži attīstās rezistence pret standarta ārstēšanas metodēm. NUGC-3 šūnas izmanto zāļu skrīninga testos, lai pārbaudītu citotoksisko vielu, mērķtiecīgo terapiju un kombinēto ārstēšanas metožu efektivitāti. Turklāt tās nodrošina stabilu platformu audzēja un stromas mijiedarbības izpētei un audzēja mikrovides lomas izpētei kuņģa vēža progresēšanā. Tādējādi NUGC-3 joprojām ir vērtīgs resurss kuņģa vēža pētniecības un terapijas attīstības veicināšanai.

Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Brachialis muskulis
Sinonīmi
  • NUGC3
  • NU-GC-3
  • Nagoya University-Gastric Cancer-3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs

04Identifikatori

Atsauce
NUGC-3 (Cytion kataloga numurs 305503)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1612

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: TP53; Vienkārša; p.Tyr220Cys (c.659A>G), nenoteikta

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu atkarībā no kultūras trauka lieluma (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai) un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C, līdz šūnas atdalās (5-10 minūtes). Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni.
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁴/cm²
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
72 gadi
Etniskā piederība
Japāņu