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9L/lacZ
Tissu
Cerveau
Maladie
Gliome malin de rat
Synonymes
9L/LacZ

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9L/lacZ

Cell line · Référence du produit 305208

The 9L/lacZ cell line is a well-characterized rat gliosarcoma cell line commonly used in neurobiological and oncological research. Originally derived from...

€430.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire 9L/lacZ est une lignée cellulaire de gliosarcome de rat bien caractérisée, couramment utilisée dans la recherche neurobiologique et oncologique. Dérivée à l'origine d'une tumeur cérébrale de rat induite par la nitrosourée, cette lignée a été modifiée pour exprimer le gène lacZ, qui code pour l'enzyme β-galactosidase. Cette modification facilite le suivi et l'étude des cellules tumorales in vivo, ce qui est particulièrement utile dans les expériences portant sur la progression tumorale et les métastases. L'expression de lacZ permet d'identifier facilement ces cellules à l'aide de la coloration X-gal, qui colore les cellules en bleu lorsqu'elles expriment la β-galactosidase.

Ces cellules présentent des capacités agressives de formation de tumeurs lorsqu'elles sont implantées dans des hôtes immunodéprimés ou syngéniques, ce qui en fait un modèle robuste pour étudier la dynamique du cancer du cerveau et tester des stratégies thérapeutiques contre les gliomes. En outre, la lignée cellulaire 9L/lacZ a été utilisée dans des essais de thérapie génique, en particulier pour évaluer l'efficacité des gènes suicides et d'autres interventions génétiques visant à contrôler la croissance des tumeurs. Cette lignée est également essentielle pour comprendre les interactions entre les cellules tumorales et le système immunitaire de l'hôte, ce qui permet de mieux comprendre les complexités de l'immunologie des tumeurs.

Tissu
Cerveau
Maladie
Gliome malin de rat
Synonymes
  • 9L/LacZ

02Classification

Organisme
Rat
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This rat glioma cell line (9L/lacZ) contains lacZ and Tn5-neo genes delivered via a replication-deficient BAG retroviral vector, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The modification is stable in 9L glioma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Fibroblaste

04Identifiants

Référence
9L/lacZ (numéro de catalogue Cytion 305208)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5656

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
Fischer 344