Mine otse sisu juurde
9L/lacZ
Kude
Aju
Haigus
Roti pahaloomuline glioom
Sünonüümid
9L/LacZ

Dokumendid

9L/lacZ

Cell line · Toote number 305208

The 9L/lacZ cell line is a well-characterized rat gliosarcoma cell line commonly used in neurobiological and oncological research. Originally derived from...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

9L/lacZ rakuliin on hästi iseloomustatud roti gliosarkoomi rakuliin, mida kasutatakse tavaliselt neurobioloogilistes ja onkoloogilistes uuringutes. See liin on algselt saadud nitrosoureaga indutseeritud roti ajukasvajast ja see liin on muundatud, et ekspresseerida lacZ-geeni, mis kodeerib β-galaktosidaasi ensüümi. See modifikatsioon hõlbustab kasvajarakkude jälgimist ja uurimist in vivo, mis on eriti kasulik katsetes, mis on seotud kasvajate progresseerumise ja metastaasidega. LacZ ekspressioon võimaldab neid rakke hõlpsasti identifitseerida, kasutades X-gal värvimist, mis muudab rakud siniseks, kui need ekspresseerivad β-galaktosidaasi.

Need rakud on immuunpuudulikku või süngeensesse peremeesorganismi implanteerituna agressiivse tuumori moodustamise võimega, mis muudab need rakud tugevaks mudeliks ajuvähi dünaamika uurimiseks ja glioomide vastaste ravistrateegiate katsetamiseks. Lisaks on rakuliini 9L/lacZ kasutatud geeniteraapia uuringutes, eelkõige enesetapugeenide ja muude kasvajate kasvu kontrollimisele suunatud geneetiliste sekkumiste tõhususe hindamisel. See liin on samuti oluline kasvajarakkude ja peremeesorganismi immuunsüsteemi vaheliste vastastikmõjude mõistmisel, andes seeläbi ülevaate kasvajate immunoloogia keerukusest.

Kude
Aju
Haigus
Roti pahaloomuline glioom
Sünonüümid
  • 9L/LacZ

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This rat glioma cell line (9L/lacZ) contains lacZ and Tn5-neo genes delivered via a replication-deficient BAG retroviral vector, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The modification is stable in 9L glioma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
9L/lacZ (Cytioni katalooginumber 305208)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_5656

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Fischer 344