Gå til innholdet
9L/lacZ
Vev
Hjerne
Sykdom
Malignt gliom hos rotter
Synonymer
9L/LacZ

Dokumenter

9L/lacZ

Cell line · Produktnummer 305208

The 9L/lacZ cell line is a well-characterized rat gliosarcoma cell line commonly used in neurobiological and oncological research. Originally derived from...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

9L/lacZ-cellelinjen er en velkarakterisert gliosarkomcellelinje fra rotter som ofte brukes i nevrobiologisk og onkologisk forskning. Opprinnelig stammer denne cellelinjen fra en nitrosourea-indusert hjernesvulst hos rotter, og den har blitt modifisert til å uttrykke lacZ-genet, som koder for enzymet β-galaktosidase. Denne modifikasjonen gjør det lettere å spore og studere tumorceller in vivo, noe som er spesielt nyttig i eksperimenter som involverer tumorprogresjon og metastasering. Uttrykket av lacZ gjør det enkelt å identifisere disse cellene ved hjelp av X-gal-farging, som gjør at cellene blir blå når de uttrykker β-galaktosidase.

Disse cellene har en aggressiv evne til å danne svulster når de implanteres i immunsvekkede eller syngene verter, noe som gjør dem til en robust modell for å studere hjernekreftdynamikk og teste terapeutiske strategier mot gliomer. I tillegg har 9L/lacZ-cellelinjen blitt brukt i genterapiforsøk, særlig for å vurdere effekten av selvmordsgener og andre genetiske intervensjoner som tar sikte på å kontrollere tumorvekst. Denne cellelinjen er også sentral i forståelsen av samspillet mellom tumorceller og vertens immunsystem, og bidrar dermed til innsikt i kompleksiteten i tumorimmunologi.

Vev
Hjerne
Sykdom
Malignt gliom hos rotter
Synonymer
  • 9L/LacZ

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This rat glioma cell line (9L/lacZ) contains lacZ and Tn5-neo genes delivered via a replication-deficient BAG retroviral vector, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The modification is stable in 9L glioma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
9L/lacZ (Cytion katalognummer 305208)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_5656

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
Fischer 344