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9L/lacZ
Tessuto
Cervello
Malattia
Glioma maligno di ratto
Sinonimi
9L/LacZ

Documenti

9L/lacZ

Cell line · Codice prodotto 305208

The 9L/lacZ cell line is a well-characterized rat gliosarcoma cell line commonly used in neurobiological and oncological research. Originally derived from...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare 9L/lacZ è una linea cellulare ben caratterizzata di gliosarcoma di ratto comunemente utilizzata nella ricerca neurobiologica e oncologica. Originariamente derivata da un tumore cerebrale di ratto indotto dalla nitrosourea, questa linea è stata modificata per esprimere il gene lacZ, che codifica l'enzima β-galattosidasi. Questa modifica facilita il tracciamento e lo studio delle cellule tumorali in vivo, particolarmente utile negli esperimenti che riguardano la progressione del tumore e le metastasi. L'espressione di lacZ consente di identificare facilmente queste cellule utilizzando la colorazione X-gal, che fa diventare le cellule blu quando esprimono la β-galattosidasi.

Queste cellule mostrano una capacità aggressiva di formare tumori quando vengono impiantate in ospiti immunocompromessi o singenici, il che le rende un modello robusto per studiare le dinamiche del cancro al cervello e testare strategie terapeutiche contro i gliomi. Inoltre, la linea cellulare 9L/lacZ è stata utilizzata in studi di terapia genica, in particolare per valutare l'efficacia dei geni suicidi e di altri interventi genetici volti a controllare la crescita tumorale. Questa linea è anche fondamentale per comprendere le interazioni tra le cellule tumorali e il sistema immunitario dell'ospite, contribuendo così a comprendere le complessità dell'immunologia dei tumori.

Tessuto
Cervello
Malattia
Glioma maligno di ratto
Sinonimi
  • 9L/LacZ

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This rat glioma cell line (9L/lacZ) contains lacZ and Tn5-neo genes delivered via a replication-deficient BAG retroviral vector, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The modification is stable in 9L glioma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Fibroblasti

04Identificatori

Riferimento bibliografico
9L/lacZ (numero di catalogo Cytion 305208)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5656

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
Fischer 344