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9L/lacZ
Gewebe
Gehirn
Krankheit
Malignes Gliom der Ratte
Synonyme
9L/LacZ

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9L/lacZ

Cell line · Artikelnummer 305208

The 9L/lacZ cell line is a well-characterized rat gliosarcoma cell line commonly used in neurobiological and oncological research. Originally derived from...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die 9L/lacZ-Zelllinie ist eine gut charakterisierte Gliosarkom-Zelllinie der Ratte, die häufig in der neurobiologischen und onkologischen Forschung verwendet wird. Ursprünglich stammt diese Linie von einem Nitrosoharnstoff-induzierten Hirntumor der Ratte und wurde so verändert, dass sie das lacZ-Gen exprimiert, das für das Enzym β-Galactosidase kodiert. Diese Modifikation erleichtert die Verfolgung und Untersuchung von Tumorzellen in vivo, was insbesondere bei Experimenten zur Tumorprogression und Metastasierung nützlich ist. Die Expression von lacZ ermöglicht die einfache Identifizierung dieser Zellen mit Hilfe der X-Gal-Färbung, die die Zellen blau färbt, wenn sie β-Galaktosidase exprimieren.

Diese Zellen zeigen aggressive tumorbildende Fähigkeiten, wenn sie in immungeschwächte oder syngene Wirte implantiert werden, was sie zu einem robusten Modell für die Untersuchung der Hirnkrebsdynamik und die Erprobung therapeutischer Strategien gegen Gliome macht. Darüber hinaus wurde die 9L/lacZ-Zelllinie in Gentherapieversuchen eingesetzt, insbesondere zur Bewertung der Wirksamkeit von Selbstmordgenen und anderen genetischen Eingriffen zur Kontrolle des Tumorwachstums. Diese Zelllinie ist auch von zentraler Bedeutung für das Verständnis der Wechselwirkungen zwischen Tumorzellen und dem Immunsystem des Wirts und trägt damit zum Verständnis der Komplexität der Tumorimmunologie bei.

Gewebe
Gehirn
Krankheit
Malignes Gliom der Ratte
Synonyme
  • 9L/LacZ

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This rat glioma cell line (9L/lacZ) contains lacZ and Tn5-neo genes delivered via a replication-deficient BAG retroviral vector, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The modification is stable in 9L glioma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblasten

04Bezeichner

Quellenangabe
9L/lacZ (Cytion-Katalognummer 305208)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_5656

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
Fischer 344