Pāriet uz saturu
9L/lacZ
Audums
Smadzenes
Slimība
Žurku ļaundabīgā glioma
Sinonīmi
9L/LacZ

Dokumenti

9L/lacZ

Cell line · Preces numurs 305208

The 9L/lacZ cell line is a well-characterized rat gliosarcoma cell line commonly used in neurobiological and oncological research. Originally derived from...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

9L/lacZ šūnu līnija ir labi raksturota žurku gliosarkomu šūnu līnija, ko parasti izmanto neirobioloģiskos un onkoloģiskos pētījumos. Šī līnija, kas sākotnēji iegūta no nitrozomvielas izraisīta žurku smadzeņu audzēja, ir izstrādāta, lai ekspresētu lacZ gēnu, kas kodē fermentu β-galaktozidāzi. Šī modifikācija atvieglo audzēja šūnu izsekošanu un izpēti in vivo, kas īpaši noder eksperimentos, kas saistīti ar audzēja progresēšanu un metastāzēm. LacZ ekspresija ļauj viegli identificēt šīs šūnas, izmantojot X-gal krāsošanu, kas, ja šūnas ekspresē β-galaktozidāzi, tās iekrāso zilā krāsā.

Šīm šūnām piemīt agresīvas audzēja veidošanās spējas, ja tās implantē imūnkompromitētiem vai singēniskiem saimniekiem, padarot tās par stabilu modeli smadzeņu vēža dinamikas izpētei un terapeitisko stratēģiju izmēģināšanai pret gliomām. Turklāt 9L/lacZ šūnu līnija ir izmantota gēnu terapijas izmēģinājumos, jo īpaši novērtējot pašnāvības gēnu un citu ģenētisku iejaukšanās pasākumu efektivitāti, lai kontrolētu audzēja augšanu. Šai līnijai ir arī izšķiroša nozīme audzēja šūnu un saimnieka imūnsistēmas mijiedarbības izpratnē, tādējādi veicinot izpratni par audzēju imunoloģijas sarežģītību.

Audums
Smadzenes
Slimība
Žurku ļaundabīgā glioma
Sinonīmi
  • 9L/LacZ

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This rat glioma cell line (9L/lacZ) contains lacZ and Tn5-neo genes delivered via a replication-deficient BAG retroviral vector, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The modification is stable in 9L glioma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
9L/lacZ (Cytion kataloga numurs 305208)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_5656

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Fischer 344