Ga naar de inhoud
9L/lacZ
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Kwaadaardig glioom bij ratten
Synoniemen
9L/LacZ

Documenten

9L/lacZ

Cell line · Productnummer 305208

The 9L/lacZ cell line is a well-characterized rat gliosarcoma cell line commonly used in neurobiological and oncological research. Originally derived from...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De 9L/lacZ cellijn is een goed gekarakteriseerde gliosarcoom cellijn van ratten die veel gebruikt wordt in neurobiologisch en oncologisch onderzoek. Deze lijn is oorspronkelijk afgeleid van een nitrosoureum-geïnduceerde hersentumor bij ratten en is zodanig gemodificeerd dat het lacZ-gen, dat codeert voor het enzym β-galactosidase, tot expressie komt. Deze modificatie vergemakkelijkt het opsporen en bestuderen van tumorcellen in vivo, wat vooral nuttig is in experimenten met tumorgroei en metastase. Door de expressie van lacZ kunnen deze cellen gemakkelijk worden geïdentificeerd met X-gal kleuring, die de cellen blauw kleurt als ze β-galactosidase tot expressie brengen.

Deze cellen vertonen agressieve tumorvormende capaciteiten wanneer ze geïmplanteerd worden in immuungecompromitteerde of syngene gastheren, waardoor ze een robuust model vormen voor het bestuderen van de dynamiek van hersenkanker en het testen van therapeutische strategieën tegen gliomen. Daarnaast is de 9L/lacZ cellijn gebruikt in gentherapie studies, met name bij het beoordelen van de werkzaamheid van zelfmoordgenen en andere genetische interventies gericht op het controleren van tumorgroei. Deze lijn is ook van cruciaal belang voor het begrijpen van de interacties tussen tumorcellen en het immuunsysteem van de gastheer, waardoor inzicht wordt verkregen in de complexiteit van tumorimmunologie.

Weefsel
Hersenen
Ziekte
Kwaadaardig glioom bij ratten
Synoniemen
  • 9L/LacZ

02Classificatie

Organisme
Rat
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This rat glioma cell line (9L/lacZ) contains lacZ and Tn5-neo genes delivered via a replication-deficient BAG retroviral vector, enabling β-galactosidase expression and neomycin resistance. The modification is stable in 9L glioma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
9L/lacZ (Cytion catalogusnummer 305208)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_5656

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
Fischer 344