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Cellules HS-695T
Tissu
Peau
Maladie
Mélanome amélanotique
Site métastatique
Ganglion lymphatique
Synonymes
Hs 695.T, Hs-695-T, Hs 695T, HS 695T, Hs695T, HS695T, Hs695

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Cellules HS-695T

Cell line · Référence du produit 300211

La lignée cellulaire HS-695T est issue d'un mélanome humain, un type de cancer de la peau caractérisé par la transformation maligne des mélanocytes. Ces cellules ont été...

€430.00hors taxes et frais de port
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01Informations générales

Description

La lignée cellulaire HS-695T est dérivée du mélanome humain, un type de cancer de la peau caractérisé par la transformation maligne des mélanocytes. Ces cellules ont été obtenues à l'origine à partir d'un patient adulte et ont depuis été largement utilisées dans la recherche sur la biologie du mélanome, la tumorigenèse et les métastases cancéreuses. La lignée cellulaire HS-695T présente des caractéristiques clés du mélanome, notamment la capacité de proliférer rapidement et de former des tumeurs lorsqu'elle est transplantée dans des souris immunodéprimées. Cette lignée cellulaire conserve de nombreuses caractéristiques moléculaires et génétiques de la tumeur d'origine, ce qui en fait un modèle précieux pour l'étude des mécanismes sous-jacents de la progression du mélanome et pour l'essai d'agents thérapeutiques potentiels.

Les cellules HS-695T expriment divers marqueurs associés au mélanome, notamment Melan-A, la tyrosinase et HMB-45, qui sont couramment utilisés pour identifier et étudier les tumeurs mélanocytaires. Ces cellules sont également connues pour présenter des mutations dans des gènes tels que BRAF et NRAS, qui sont fréquemment observés dans le mélanome et contribuent aux voies de signalisation oncogéniques qui régissent la croissance et la survie des tumeurs. Les chercheurs utilisent la lignée cellulaire HS-695T pour explorer les effets des thérapies ciblées, notamment les inhibiteurs de BRAF et de MEK, et pour étudier le développement de la résistance à ces traitements. Dans l'ensemble, la lignée cellulaire HS-695T est un outil essentiel dans la recherche sur le mélanome, qui contribue à la découverte de nouvelles stratégies thérapeutiques et à l'amélioration de notre compréhension de ce cancer agressif.

Tissu
Peau
Maladie
Mélanome amélanotique
Site métastatique
Ganglion lymphatique
Synonymes
  • Hs 695.T
  • Hs-695-T
  • Hs 695T
  • HS 695T
  • Hs695T
  • HS695T
  • Hs695

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Oui, chez les souris immunodéprimées
Caryotype
(P19-40) mode = 52, présence d'un chromosome Y

04Identifiants

Référence
HS-695T (numéro de catalogue Cytion 300211)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0851

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
P53 positif
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fréquence du phénotype Produit : 0.0427
Profil mutationnel
BRAF V600Emut

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
26 ans
Origine ethnique
Caucasien