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Células HS-695T
Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma amelanótico
Lugar de metástasis
Ganglio linfático
Sinónimos
Hs 695.T, Hs-695-T, Hs 695T, HS 695T, Hs695T, HS695T, Hs695

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Células HS-695T

Cell line · Número de producto 300211

La línea celular HS-695T procede de un melanoma humano, un tipo de cáncer de piel que se caracteriza por la transformación maligna de los melanocitos. Estas células fueron...

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01Información general

Descripción

La línea celular HS-695T procede de un melanoma humano, un tipo de cáncer de piel caracterizado por la transformación maligna de los melanocitos. Estas células se obtuvieron originalmente de un paciente adulto y desde entonces se han utilizado ampliamente en investigaciones centradas en la biología del melanoma, la tumorigénesis y la metástasis del cáncer. La línea celular HS-695T presenta características clave del melanoma, como la capacidad de proliferar rápidamente y formar tumores cuando se trasplanta a ratones inmunodeficientes. Esta línea celular conserva muchas de las características moleculares y genéticas del tumor original, lo que la convierte en un modelo valioso para estudiar los mecanismos subyacentes de la progresión del melanoma y para probar posibles agentes terapéuticos.

Las células HS-695T expresan varios marcadores asociados al melanoma, como Melan-A, tirosinasa y HMB-45, que se utilizan habitualmente para identificar y estudiar tumores melanocíticos. También se sabe que estas células presentan mutaciones en genes como BRAF y NRAS, que se observan con frecuencia en el melanoma y contribuyen a las vías de señalización oncogénica que impulsan el crecimiento y la supervivencia de los tumores. Los investigadores utilizan la línea celular HS-695T para explorar los efectos de terapias dirigidas, incluidos los inhibidores de BRAF y MEK, y para investigar el desarrollo de resistencia a estos tratamientos. En general, la línea celular HS-695T es una herramienta fundamental en la investigación del melanoma, que ayuda a descubrir nuevas estrategias terapéuticas y a mejorar nuestra comprensión de este agresivo cáncer.

Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma amelanótico
Lugar de metástasis
Ganglio linfático
Sinónimos
  • Hs 695.T
  • Hs-695-T
  • Hs 695T
  • HS 695T
  • Hs695T
  • HS695T
  • Hs695

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones inmunodeprimidos
Cariotipo
(P19-40) modo = 52, cromosoma Y presente

04Identificadores

Referencia
HS-695T (número de catálogo 300211 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0851

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
P53 positivo
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotipo Frecuencia Producto: 0.0427
Perfil mutacional
BRAF V600Emut

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
2 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
26 años
Origen étnico
Caucásico