Перейти до вмісту
Елементи HS-695T
Тканина
Шкіра
Хвороба
Амеланотична меланома
Місце метастазування
Лімфатичний вузол
Синоніми
Hs 695.T, Hs-695-T, Hs 695T, HS 695T, Hs695T, HS695T, Hs695

Документи

Елементи HS-695T

Cell line · Номер товару 300211

Клітинна лінія HS-695T походить від людської меланоми — різновиду раку шкіри, що характеризується злоякісною трансформацією меланоцитів. Ці клітини були...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинну лінію HS-695T отримано з меланоми людини, типу раку шкіри, що характеризується злоякісною трансформацією меланоцитів. Ці клітини були отримані від дорослого пацієнта і з тих пір широко використовуються в дослідженнях біології меланоми, пухлиногенезу та метастазування раку. Клітинна лінія HS-695T має ключові характеристики меланоми, включаючи здатність швидко проліферувати і утворювати пухлини при трансплантації мишам з ослабленим імунітетом. Ця клітинна лінія зберігає багато молекулярних і генетичних особливостей оригінальної пухлини, що робить її цінною моделлю для вивчення глибинних механізмів прогресування меланоми і тестування потенційних терапевтичних агентів.

Клітини HS-695T експресують різні меланома-асоційовані маркери, включаючи Melan-A, тирозиназу та HMB-45, які зазвичай використовуються для ідентифікації та вивчення меланоцитарних пухлин. Відомо, що ці клітини також мають мутації в генах BRAF і NRAS, які часто спостерігаються при меланомі і сприяють онкогенним сигнальним шляхам, що керують ростом і виживанням пухлини. Дослідники використовують клітинну лінію HS-695T для вивчення ефектів таргетної терапії, включаючи інгібітори BRAF і MEK, а також для дослідження розвитку резистентності до цих методів лікування. В цілому, клітинні лінії HS-695T є важливим інструментом у дослідженні меланоми, допомагаючи у відкритті нових терапевтичних стратегій та покращуючи наше розуміння цього агресивного виду раку.

Тканина
Шкіра
Хвороба
Амеланотична меланома
Місце метастазування
Лімфатичний вузол
Синоніми
  • Hs 695.T
  • Hs-695-T
  • Hs 695T
  • HS 695T
  • Hs695T
  • HS695T
  • Hs695

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Так, у мишей з пригніченим імунітетом
Каріотип
(P19-40) режим = 52, присутня Y-хромосома

04Ідентифікатори

Посилання
HS-695T (номер за каталогом Cytion 300211)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0851

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
P53 позитивний
Ізоферменти
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Phenotype Frequency Product: 0.0427
Профіль мутацій
BRAF V600Emut

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
2 x 104 клітини/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
26 років
Етнічна приналежність
Кавказець