Mine otse sisu juurde
HS-695T rakud
Kude
Nahk
Haigus
Amelanootiline melanoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
Hs 695.T, Hs-695-T, Hs 695T, HS 695T, Hs695T, HS695T, Hs695

Dokumendid

HS-695T rakud

Cell line · Toote number 300211

Rakuliin HS-695T on saadud inimese melanoomist, mis on nahavähi liik, mida iseloomustab melanootsüütide pahaloomuline muutumine. Need rakud olid...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HS-695T rakuliin on saadud inimese melanoomist, mis on nahavähi tüüp, mida iseloomustab melanotsüütide pahaloomuline muundumine. Need rakud saadi algselt täiskasvanud patsiendilt ja neid on sellest ajast saadik laialdaselt kasutatud melanoomi bioloogia, kasvajate tekke ja vähi metastaaside uurimisel. HS-695T rakuliinil on melanoomi põhilised omadused, sealhulgas võime kiiresti paljuneda ja moodustada kasvajat, kui see siirdatakse immuunpuudulikku hiirtesse. See rakuliin säilitab paljud algse kasvaja molekulaarsed ja geneetilised omadused, mis teeb sellest väärtusliku mudeli melanoomi progresseerumise aluseks olevate mehhanismide uurimiseks ja potentsiaalsete raviainete testimiseks.

HS-695T rakud ekspresseerivad erinevaid melanoomiga seotud markereid, sealhulgas Melan-A, türosinaasi ja HMB-45, mida tavaliselt kasutatakse melanotsüütiliste kasvajate identifitseerimiseks ja uurimiseks. Nendel rakkudel on teadaolevalt ka mutatsioonid sellistes geenides nagu BRAF ja NRAS, mida melanoomi puhul sageli täheldatakse ja mis aitavad kaasa onkogeensetele signaaliradadele, mis juhivad kasvaja kasvu ja ellujäämist. Teadlased kasutavad HS-695T rakuliini, et uurida sihtotstarbeliste ravimeetodite, sealhulgas BRAFi ja MEKi inhibiitorite mõju ning uurida resistentsuse tekkimist nende ravimeetodite suhtes. Üldiselt on HS-695T rakuliin kriitilise tähtsusega vahend melanoomi uurimisel, aidates kaasa uute ravistrateegiate avastamisele ja parandades meie arusaamist sellest agressiivsest vähktõvest.

Kude
Nahk
Haigus
Amelanootiline melanoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
  • Hs 695.T
  • Hs-695-T
  • Hs 695T
  • HS 695T
  • Hs695T
  • HS695T
  • Hs695

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, immuunsupressiooniga hiirtel
Karyotüüp
(P19-40) režiim = 52, Y-kromosoomi olemasolu

04Tunnused

Viide
HS-695T (Cytioni katalooginumber 300211)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0851

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, fenotüübi sageduse toode: 0.0427
Mutatsiooniprofiil
BRAF V600Emut

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
26 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia