الانتقال إلى المحتوى
خلايا HS-695T
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني الأميلاني
موقع الانتشار
العقدة اللمفاوية
المرادفات
Hs 695.T, Hs-695-T, Hs 695T, HS 695T, Hs695T, HS695T, Hs695

المستندات

خلايا HS-695T

Cell line · رقم المنتج 300211

سلسلة الخلايا HS-695T مستمدة من الورم الميلانيني البشري، وهو نوع من سرطان الجلد يتميز بالتحول الخبيث للخلايا الصباغية. وقد كانت هذه الخلايا...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُشتق خط الخلايا HS-695T من الورم الميلانيني البشري، وهو نوع من سرطان الجلد يتميز بالتحول الخبيث للخلايا الصباغية. وقد تم الحصول على هذه الخلايا في الأصل من مريض بالغ، ومنذ ذلك الحين تم استخدامها على نطاق واسع في الأبحاث التي تركز على بيولوجيا الورم الميلانيني وتكوين الورم وانتشار السرطان. يُظهر الخط الخلوي HS-695T الخصائص الرئيسية للورم الميلانيني بما في ذلك القدرة على التكاثر السريع وتشكيل الأورام عند زرعها في فئران مناعية. يحتفظ هذا الخط الخلوي بالعديد من السمات الجزيئية والوراثية للورم الأصلي، مما يجعله نموذجاً قيماً لدراسة الآليات الكامنة وراء تطور الورم الميلانيني واختبار العوامل العلاجية المحتملة.

تعبر خلايا HS-695T عن العديد من العلامات المرتبطة بالورم الميلانيني بما في ذلك الميلان-أ والتيروزيناز والتيروزيناز وHMB-45، والتي تُستخدم عادةً لتحديد الأورام الميلانينية ودراستها. من المعروف أيضًا أن هذه الخلايا تحتوي على طفرات في جينات مثل BRAF وNRAS، والتي تُلاحظ بشكل متكرر في الورم الميلانيني وتساهم في مسارات الإشارات الورمية التي تقود نمو الورم وبقائه. يستخدم الباحثون خط الخلايا HS-695T لاستكشاف تأثيرات العلاجات الموجهة، بما في ذلك مثبطات BRAF و MEK، ودراسة تطور مقاومة هذه العلاجات. وبشكل عام، يُعد خط الخلايا HS-695T أداة مهمة في أبحاث سرطان الجلد، حيث يساعد في اكتشاف استراتيجيات علاجية جديدة وتحسين فهمنا لهذا السرطان العدواني.

الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني الأميلاني
موقع الانتشار
العقدة اللمفاوية
المرادفات
  • Hs 695.T
  • Hs-695-T
  • Hs 695T
  • HS 695T
  • Hs695T
  • HS695T
  • Hs695

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران المثبطة للمناعة
النمط الكروموسومي
(P19-40) الوضع = 52، الكروموسوم Y موجود

04المعرّفات

المرجع
HS-695T (كتالوج سيتيون رقم 300211)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0851

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
P53 إيجابي
الإيزوزيمات
G6PD، ب، PGM1، 1، PGM3، 1، ES-D، 1، Me-2، 0، AK-1، 1، GLO-1، 1، منتج تردد النمط الظاهري 0.0427
الأنماط الطفريّة
BRAF V600Emut

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
2 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
26 سنة
الأصل العرقي
قوقازي