Gå til innholdet
HS-695T-celler
Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Lymfeknute
Synonymer
Hs 695.T, Hs-695-T, Hs 695T, HS 695T, Hs695T, HS695T, Hs695

Dokumenter

HS-695T-celler

Cell line · Produktnummer 300211

Cellelinjen HS-695T stammer fra humant melanom, en type hudkreft som kjennetegnes ved ondartet forandring av melanocytter. Disse cellene ble...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HS-695T-cellelinjen stammer fra humant melanom, en type hudkreft som kjennetegnes av ondartet transformasjon av melanocytter. Cellene ble opprinnelig hentet fra en voksen pasient, og har siden blitt brukt i utstrakt grad i forskning på melanomets biologi, tumorigenese og kreftmetastasering. HS-695T-cellelinjen har viktige kjennetegn ved melanom, blant annet evnen til å spre seg raskt og danne svulster når den transplanteres til mus med nedsatt immunforsvar. Denne cellelinjen beholder mange av de molekylære og genetiske egenskapene til den opprinnelige svulsten, noe som gjør den til en verdifull modell for å studere de underliggende mekanismene for melanomprogresjon og for å teste ut potensielle behandlingsmidler.

HS-695T-celler uttrykker ulike melanom-assosierte markører, inkludert Melan-A, tyrosinase og HMB-45, som ofte brukes til å identifisere og studere melanocytiske svulster. Disse cellene er også kjent for å ha mutasjoner i gener som BRAF og NRAS, som ofte observeres i melanom og bidrar til de onkogene signalveiene som driver tumorvekst og -overlevelse. Forskerne bruker HS-695T-cellelinjen til å utforske effekten av målrettede behandlinger, inkludert BRAF- og MEK-hemmere, og til å undersøke utviklingen av resistens mot disse behandlingene. HS-695T-cellelinjen er et viktig verktøy i melanomforskningen, og den bidrar til å finne nye behandlingsstrategier og forbedre vår forståelse av denne aggressive kreftformen.

Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Lymfeknute
Synonymer
  • Hs 695.T
  • Hs-695-T
  • Hs 695T
  • HS 695T
  • Hs695T
  • HS695T
  • Hs695

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i immunsupprimerte mus
Karyotype
(P19-40) modus = 52, Y-kromosom til stede

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HS-695T (Cytion-katalognummer 300211)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0851

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
P53-positiv
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0427
Mutasjonsprofil
BRAF V600Emut

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
26 år
Etnisitet
Kaukasisk