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COLO-60H
Tissu
Colon transversal
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

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COLO-60H

Cell line · Référence du produit 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

€800.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire COLO-60H a été dérivée d'un échantillon de biopsie prélevé sur un adénocarcinome non traité chez un patient de sexe masculin. Créée en 1998, cette lignée cellulaire présente un intérêt particulier pour la recherche sur le cancer en raison de son origine dans le cancer colorectal, une forme courante et souvent mortelle de cancer qui prend naissance dans la muqueuse du côlon ou du rectum. Les adénocarcinomes se caractérisent par l'origine glandulaire des cellules tumorales, ce qui permet de mieux comprendre les processus cellulaires tels que la sécrétion et l'absorption qui sont détournés au cours du développement du cancer.

Les cellules COLO-60H présentent l'allèle HLA-A*0201, ce qui en fait un modèle précieux pour les études immunologiques, en particulier dans le contexte de l'immunologie des tumeurs. La présence de ce type spécifique d'antigène leucocytaire humain (HLA) est cruciale pour la présentation d'antigènes aux cellules T, influençant la capacité du système immunitaire à reconnaître et à détruire les cellules cancéreuses. Cette caractéristique justifie l'utilisation de COLO-60H pour évaluer l'efficacité des agents immunothérapeutiques et pour étudier les interactions entre les cellules tumorales et le système immunitaire dans un contexte histocompatible. La pertinence de cette lignée cellulaire s'étend à la recherche pharmacologique, où elle peut être utilisée pour évaluer les réponses aux médicaments et explorer les mécanismes de résistance qui sont essentiels à l'avancement de la médecine personnalisée pour le traitement du cancer colorectal.

Tissu
Colon transversal
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial

04Identifiants

Référence
COLO-60H (numéro de catalogue Cytion 300456)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4572

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 est recommandé
Renouvellement des fluides
Tous les 3 à 5 jours
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
73 ans