Премини към съдържанието
COLO-60H
Тъкан
Colon transversum
Заболяване
Аденокарцином
Синоними
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

Документи

COLO-60H

Cell line · Номер на продукта 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

€800.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия COLO-60H е получена от биопсична проба, взета от нелекуван аденокарцином на пациент от мъжки пол. Създадена през 1998 г., тази клетъчна линия представлява особен интерес в изследванията на рака поради произхода си от колоректалния рак - често срещана и често смъртоносна форма на рак, която започва в лигавицата на дебелото черво или ректума. Самите аденокарциноми се характеризират с жлезист произход на туморните клетки, което може да даде представа за клетъчните процеси като секреция и абсорбция, които са превзети по време на развитието на рака.

Клетките COLO-60H притежават алела HLA-A*0201, което ги прави ценен модел за имунологични изследвания, особено в контекста на туморната имунология. Наличието на този специфичен тип човешки левкоцитен антиген (HLA) е от решаващо значение за представянето на антигени на Т-клетките, което влияе върху способността на имунната система да разпознава и унищожава раковите клетки. Тази характеристика подкрепя използването на COLO-60H за оценка на ефикасността на имунотерапевтичните агенти и за изучаване на взаимодействията между туморните клетки и имунната система в хистосъвместима среда. Значението на тази клетъчна линия се разпростира и върху фармакологичните изследвания, където тя може да се използва за оценка на лекарствените реакции и изследване на механизмите на резистентност, които са от решаващо значение за напредъка на персонализираната медицина за лечение на колоректален рак.

Тъкан
Colon transversum
Заболяване
Аденокарцином
Синоними
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
COLO-60H (каталожен номер 300456 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_4572

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
Препоръчва се 1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
На всеки 3 до 5 дни
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
73 години