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COLO-60H
Tessuto
Colon trasversale
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

Documenti

COLO-60H

Cell line · Codice prodotto 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare COLO-60H è stata derivata da un campione bioptico prelevato da un adenocarcinoma non trattato di un paziente maschio. Fondata nel 1998, questa linea cellulare è di particolare interesse per la ricerca sul cancro a causa della sua origine nel cancro del colon-retto, una forma comune e spesso letale di cancro che inizia nel rivestimento del colon o del retto. Gli adenocarcinomi stessi sono caratterizzati dall'origine ghiandolare delle cellule tumorali, che può fornire indicazioni sui processi cellulari, come la secrezione e l'assorbimento, che vengono dirottati durante lo sviluppo del cancro.

Le cellule COLO-60H presentano l'allele HLA-A*0201, che le rende un modello prezioso per gli studi immunologici, in particolare nel contesto dell'immunologia dei tumori. La presenza di questo specifico tipo di antigene leucocitario umano (HLA) è fondamentale per la presentazione di antigeni alle cellule T, influenzando la capacità del sistema immunitario di riconoscere e distruggere le cellule tumorali. Questa caratteristica supporta l'uso di COLO-60H nella valutazione dell'efficacia degli agenti immunoterapici e nello studio delle interazioni tra le cellule tumorali e il sistema immunitario in un contesto istocompatibile. La rilevanza di questa linea cellulare si estende alla ricerca farmacologica, dove può essere utilizzata per valutare le risposte ai farmaci ed esplorare i meccanismi di resistenza, fondamentali per il progresso della medicina personalizzata per il trattamento del cancro colorettale.

Tessuto
Colon trasversale
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
COLO-60H (numero di catalogo Cytion 300456)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4572

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Si consiglia 1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3-5 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
73 anni