Siirry sisältöön
COLO-60H
Kudos
Colon transversum
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

Asiakirjat

COLO-60H

Cell line · Tuotenumero 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

COLO-60H-solulinja on peräisin biopsianäytteestä, joka on otettu miespotilaan hoitamattomasta adenokarsinoomasta. Tämä vuonna 1998 perustettu solulinja on erityisen kiinnostava syöpätutkimuksen kannalta, koska se on peräisin paksu- ja peräsuolen syövästä, joka on yleinen ja usein kuolemaan johtava syöpämuoto, joka saa alkunsa paksu- tai peräsuolen limakalvolta. Adenokarsinoomille itselleen on ominaista kasvainsolujen rauhasperäinen alkuperä, mikä voi antaa tietoa soluprosesseista, kuten erittymisestä ja imeytymisestä, jotka kaapataan syövän kehittymisen aikana.

COLO-60H-soluilla on HLA-A*0201-alleeli, mikä tekee niistä arvokkaan mallin immunologisiin tutkimuksiin, erityisesti kasvainten immunologian yhteydessä. Tämän HLA-tyypin (Human Leukocyte Antigen, ihmisen leukosyyttiantigeeni) esiintyminen on ratkaisevaa antigeenien esittämisessä T-soluille, mikä vaikuttaa immuunijärjestelmän kykyyn tunnistaa ja tuhota syöpäsoluja. Tämä ominaisuus tukee COLO-60H:n käyttöä immunoterapeuttisten aineiden tehokkuuden arvioinnissa sekä kasvainsolujen ja immuunijärjestelmän välisten vuorovaikutusten tutkimisessa histokompatisoituvassa ympäristössä. Tämän solulinjan merkitys ulottuu myös farmakologiseen tutkimukseen, jossa sitä voidaan käyttää lääkevasteiden arviointiin ja resistenssimekanismien tutkimiseen, mikä on ratkaisevan tärkeää, kun kehitetään yksilöllistä lääketiedettä paksusuolen ja peräsuolen syövän hoidossa.

Kudos
Colon transversum
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
COLO-60H (Cytionin luettelonumero 300456)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_4572

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Suositellaan 1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
73 vuotta