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COLO-60H
Gewebe
Colon transversum
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

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COLO-60H

Cell line · Artikelnummer 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie COLO-60H wurde aus einer Biopsieprobe eines unbehandelten Adenokarzinoms eines männlichen Patienten gewonnen. Diese Zelllinie wurde 1998 etabliert und ist für die Krebsforschung von besonderem Interesse, da sie aus dem kolorektalen Karzinom stammt, einer häufigen und oft tödlich verlaufenden Krebsart, die in der Schleimhaut des Dickdarms oder des Enddarms ihren Anfang nimmt. Adenokarzinome zeichnen sich dadurch aus, dass die Tumorzellen aus Drüsen stammen, was Aufschluss über zelluläre Prozesse wie Sekretion und Absorption geben kann, die während der Krebsentwicklung gestört werden.

COLO-60H-Zellen weisen das HLA-A*0201-Allel auf, was sie zu einem wertvollen Modell für immunologische Studien macht, insbesondere im Zusammenhang mit der Tumorimmunologie. Das Vorhandensein dieses spezifischen HLA-Typs (Humanes Leukozyten-Antigen) ist entscheidend für die Präsentation von Antigenen für T-Zellen und beeinflusst die Fähigkeit des Immunsystems, Krebszellen zu erkennen und zu zerstören. Diese Eigenschaft spricht für den Einsatz von COLO-60H bei der Bewertung der Wirksamkeit von Immuntherapeutika und bei der Untersuchung der Wechselwirkungen zwischen Tumorzellen und dem Immunsystem in einem histokompatiblen Umfeld. Die Relevanz dieser Zelllinie erstreckt sich auch auf die pharmakologische Forschung, wo sie zur Bewertung des Ansprechens auf Medikamente und zur Erforschung von Resistenzmechanismen eingesetzt werden kann, die für die Weiterentwicklung der personalisierten Medizin bei der Behandlung von Darmkrebs entscheidend sind.

Gewebe
Colon transversum
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
COLO-60H (Cytion Katalognummer 300456)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_4572

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² wird empfohlen.
Flüssigkeitswechsel
Alle 3 bis 5 Tage
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
73 Jahre