Přejít na obsah
COLO-60H
Tkáň
Colon transversum
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

Dokumenty

COLO-60H

Cell line · Číslo výrobku 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie COLO-60H byla odvozena z bioptického vzorku odebraného z neléčeného adenokarcinomu u muže. Tato buněčná linie byla založena v roce 1998 a je zvláště zajímavá pro výzkum rakoviny, protože pochází z kolorektálního karcinomu, což je častá a často smrtelná forma rakoviny, která vzniká ve sliznici tlustého střeva nebo konečníku. Samotné adenokarcinomy se vyznačují žlázovým původem nádorových buněk, což může umožnit nahlédnout do buněčných procesů, jako je vylučování a vstřebávání, které jsou během vývoje rakoviny narušeny.

Buňky COLO-60H vykazují alelu HLA-A*0201, což z nich činí cenný model pro imunologické studie, zejména v kontextu nádorové imunologie. Přítomnost tohoto specifického typu lidského leukocytárního antigenu (HLA) je klíčová pro prezentaci antigenů T-lymfocytům, což ovlivňuje schopnost imunitního systému rozpoznat a zničit nádorové buňky. Tato vlastnost podporuje použití COLO-60H při hodnocení účinnosti imunoterapeutických látek a při studiu interakcí mezi nádorovými buňkami a imunitním systémem v histokompatibilním prostředí. Význam této buněčné linie se rozšiřuje i na farmakologický výzkum, kde ji lze využít k hodnocení reakcí na léčiva a zkoumání mechanismů rezistence, které jsou zásadní pro rozvoj personalizované medicíny pro léčbu kolorektálního karcinomu.

Tkáň
Colon transversum
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
COLO-60H (katalogové číslo Cytion 300456)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4572

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
Doporučuje se 1 x 104 buněk/cm2.
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
73 let