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COLO-60H
Pañuelo de papel
Colon transversum
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

Documentos

COLO-60H

Cell line · Número de producto 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

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01Información general

Descripción

La línea celular COLO-60H se derivó de una muestra de biopsia tomada de un adenocarcinoma no tratado en un paciente varón. Creada en 1998, esta línea celular reviste especial interés en la investigación oncológica debido a su origen en el cáncer colorrectal, una forma común y a menudo letal de cáncer que se inicia en el revestimiento del colon o el recto. Los propios adenocarcinomas se caracterizan por el origen glandular de las células tumorales, lo que puede aportar información sobre procesos celulares como la secreción y la absorción que se ven alterados durante el desarrollo del cáncer.

Las células COLO-60H presentan el alelo HLA-A*0201, lo que las convierte en un valioso modelo para estudios inmunológicos, especialmente en el contexto de la inmunología tumoral. La presencia de este tipo específico de antígeno leucocitario humano (HLA) es crucial para la presentación de antígenos a las células T, lo que influye en la capacidad del sistema inmunitario para reconocer y destruir las células cancerosas. Esta característica respalda el uso de COLO-60H en la evaluación de la eficacia de agentes inmunoterapéuticos y en el estudio de las interacciones entre las células tumorales y el sistema inmunitario en un entorno histocompatible. La relevancia de esta línea celular se extiende a la investigación farmacológica, donde puede utilizarse para evaluar las respuestas a los fármacos y explorar los mecanismos de resistencia que son críticos en el avance de la medicina personalizada para el tratamiento del cáncer colorrectal.

Pañuelo de papel
Colon transversum
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial

04Identificadores

Referencia
COLO-60H (número de catálogo 300456 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4572

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
Se recomienda 1 x 104 células/cm2.
Renovación de fluidos
Cada 3 a 5 días
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
73 años