Prejsť na obsah
COLO-60H
Tkanivo
Colon transversum
Choroba
Adenokarcinóm
Synonymá
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

Dokumenty

COLO-60H

Cell line · Číslo výrobku 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia COLO-60H bola odvodená z bioptickej vzorky odobratej z neliečeného adenokarcinómu u muža. Táto bunková línia, vytvorená v roku 1998, je mimoriadne zaujímavá pre výskum rakoviny, pretože pochádza z kolorektálneho karcinómu, bežnej a často smrteľnej formy rakoviny, ktorá vzniká v sliznici hrubého čreva alebo konečníka. Samotné adenokarcinómy sa vyznačujú žľazovým pôvodom nádorových buniek, čo môže poskytnúť pohľad na bunkové procesy, ako je vylučovanie a vstrebávanie, ktoré sú počas vývoja rakoviny narušené.

Bunky COLO-60H vykazujú alelu HLA-A*0201, čo z nich robí cenný model pre imunologické štúdie, najmä v kontexte nádorovej imunológie. Prítomnosť tohto špecifického typu ľudského leukocytového antigénu (HLA) je rozhodujúca pre prezentáciu antigénov T-bunkám, čo ovplyvňuje schopnosť imunitného systému rozpoznať a zničiť rakovinové bunky. Táto vlastnosť podporuje použitie COLO-60H pri hodnotení účinnosti imunoterapeutických látok a pri štúdiu interakcií medzi nádorovými bunkami a imunitným systémom v histokompatibilnom prostredí. Význam tejto bunkovej línie sa rozširuje aj na farmakologický výskum, kde sa môže použiť na hodnotenie odpovedí na lieky a skúmanie mechanizmov rezistencie, ktoré sú rozhodujúce pri rozvoji personalizovanej medicíny na liečbu kolorektálneho karcinómu.

Tkanivo
Colon transversum
Choroba
Adenokarcinóm
Synonymá
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
COLO-60H (katalógové číslo Cytion 300456)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4572

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
Odporúča sa 1 x 104 buniek/cm2.
Obnova kvapaliny
Každých 3 až 5 dní
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
73 rokov