Mine otse sisu juurde
COLO-60H
Kude
Colon transversum
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
COLO-60H, COLO 60H, COLO60H

Dokumendid

COLO-60H

Cell line · Toote number 300456

The COLO-60H cell line was derived from a biopsy sample taken from an untreated adenocarcinoma in a male patient. Established in 1998, this cell line is o...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

COLO-60H rakuliin on saadud biopsiaproovist, mis on võetud meessoost patsiendi ravimata adenokartsinoomist. See 1998. aastal loodud rakuliin pakub vähiuuringute jaoks erilist huvi, kuna see on pärit kolorektaalvähist, mis on levinud ja sageli surmaga lõppev vähivorm, mis saab alguse käärsoole või pärasoole limaskestast. Adenokartsinoomidele endile on iseloomulik kasvajarakkude näärmeline päritolu, mis võib anda ülevaate rakulistest protsessidest, nagu sekretsioon ja imendumine, mis on vähi arengu ajal häiritud.

COLO-60H rakkudel on HLA-A*0201 alleel, mis teeb neist väärtusliku mudeli immunoloogilisteks uuringuteks, eriti kasvajate immunoloogia kontekstis. Selle spetsiifilise inimese leukotsüütide antigeeni (HLA) tüübi olemasolu on otsustava tähtsusega antigeenide esitlemisel T-rakkudele, mõjutades immuunsüsteemi võimet ära tunda ja hävitada vähirakke. See omadus toetab COLO-60H kasutamist immunoteraapiliste ainete tõhususe hindamisel ning kasvajarakkude ja immuunsüsteemi vaheliste interaktsioonide uurimisel histokompatsiilses keskkonnas. Selle rakuliini tähtsus laieneb ka farmakoloogilistele uuringutele, kus seda saab kasutada ravimivastuste hindamiseks ja resistentsuse mehhanismide uurimiseks, mis on kriitilise tähtsusega kolorektaalvähi ravi personaliseeritud meditsiini arendamisel.

Kude
Colon transversum
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • COLO-60H
  • COLO 60H
  • COLO60H

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
COLO-60H (Cytioni katalooginumber 300456)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_4572

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Soovitatav on 1 x 104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
73 aastat