RS4:11

La lignée cellulaire RS4:11 est dérivée d'une patiente de 32 ans atteinte d'une leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) récidivante caractérisée par la translocation chromosomique t(4:11)(q21:q23). Cette translocation entraîne la formation du gène de fusion **KMT2A-AFF1 (anciennement MLL-AF4)**, qui est une caractéristique de ce sous-type de leucémie. Les cellules RS4:11 présentent un profil biphénotypique, coexprimant à la fois des marqueurs de cellules B et de cellules monocytaires, ce qui reflète les caractéristiques de lignée mixte associées à ce réarrangement génétique. Cette lignée cellulaire est largement utilisée comme modèle pour comprendre la biologie des leucémies à réarrangement KMT2A, qui sont associées à une maladie agressive et à un mauvais pronostic.

Les cellules RS4:11 présentent des caractéristiques typiques des lymphoblastes pré-B, notamment l'expression de marqueurs tels que CD19, HLA-DR et la désoxynucléotidyl transférase terminale (TdT), ainsi que le réarrangement des gènes des chaînes lourdes et légères d'immunoglobulines. Il est intéressant de noter que les cellules RS4:11 adoptent un phénotype semblable à celui des monocytes lorsqu'elles sont traitées avec des agents induisant la différenciation, comme les esters de phorbol, ce qui met en évidence leur plasticité de lignée. Cette caractéristique rend la lignée cellulaire particulièrement précieuse pour l'étude des moteurs moléculaires de la différenciation et de l'engagement de lignée dans la leucémie.

Génétiquement, la translocation t(4:11) perturbe le gène **KMT2A en 11q23**, le fusionnant avec **AFF1 (AF4)** en 4q21, conduisant à une protéine chimérique qui régule de manière aberrante l'expression des gènes, y compris les gènes Hox impliqués dans le développement hématopoïétique. Les cellules RS4:11 ont également été utilisées pour étudier les mutations secondaires, telles que celles de **FLT3**, qui contribuent à la leucémogenèse et à la résistance aux traitements. La lignée cellulaire sert de modèle préclinique robuste pour tester des thérapies ciblées, y compris des inhibiteurs de l'interaction KMT2A-AFF1 et des agents visant les voies de signalisation associées.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie