RS4:11

A linha celular RS4:11 é derivada de uma doente de 32 anos com leucemia linfoblástica aguda (LLA) recidivante caracterizada pela translocação cromossómica t(4:11)(q21:q23). Esta translocação resulta na formação do gene de fusão **KMT2A-AFF1 (anteriormente MLL-AF4)**, que é uma caraterística distintiva deste subtipo de leucemia. As células RS4:11 apresentam um perfil bifenotípico, co-expressando marcadores de células B e monocíticos, reflectindo as caraterísticas de linhagem mista associadas a este rearranjo genético. A linha celular é amplamente utilizada como modelo para compreender a biologia das leucemias com rearranjo KMT2A, que estão associadas a doença agressiva e mau prognóstico.

As células RS4:11 apresentam caraterísticas típicas de linfoblastos pré-B, incluindo a expressão de marcadores como CD19, HLA-DR e desoxinucleotidil transferase terminal (TdT), juntamente com genes de cadeias pesadas e leves de imunoglobulinas rearranjadas. É interessante notar que, após tratamento com agentes indutores de diferenciação, como os ésteres de forbol, as células RS4:11 adoptam um fenótipo semelhante ao dos monócitos, o que realça a sua plasticidade de linhagem. Esta caraterística torna esta linha celular particularmente valiosa para o estudo dos factores moleculares da diferenciação e do compromisso de linhagem na leucemia.

Do ponto de vista genético, a translocação t(4:11) interrompe o gene **KMT2A em 11q23**, fundindo-o com **AFF1 (AF4)** em 4q21, dando origem a uma proteína quimérica que regula de forma aberrante a expressão de genes, incluindo genes Hox envolvidos no desenvolvimento hematopoiético. As células RS4:11 também têm sido utilizadas para estudar mutações secundárias, como as da **FLT3**, que contribuem para a leucemogénese e a resistência ao tratamento. A linha celular serve como um modelo pré-clínico robusto para testar terapias direcionadas, incluindo inibidores da interação KMT2A-AFF1 e agentes que visam as vias de sinalização associadas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia