RS4:11

Клетъчната линия RS4:11 е получена от 32-годишна пациентка с рецидивираща остра лимфобластна левкемия (ОЛЛ), характеризираща се с хромозомна транслокация t(4:11)(q21:q23). Тази транслокация води до образуването на **KMT2A-AFF1 (преди MLL-AF4)** сливащ се ген, който е отличителен белег на този подтип левкемия. Клетките RS4:11 показват бифенотипен профил, като експресират едновременно В-клетъчни и моноцитни маркери, което отразява характеристиките на смесена линия, свързани с това генетично пренареждане. Клетъчната линия е широко използвана като модел за разбиране на биологията на левкемиите с KMT2A подредба, които се свързват с агресивно заболяване и лоша прогноза.

Клетките RS4:11 показват характеристики, типични за пре-В лимфобластите, включително експресия на маркери като CD19, HLA-DR и терминална дезоксинуклеотидилтрансфераза (TdT), заедно с пренаредени гени на тежката и леката верига на имуноглобулина. Интересно е, че при третиране с агенти, индуциращи диференциация, като например форболови естери, клетките RS4:11 приемат моноцитоподобен фенотип, което подчертава тяхната линейна пластичност. Тази характеристика прави клетъчната линия особено ценна за изучаване на молекулярните двигатели на диференциацията и линейната ангажираност при левкемията.

От генетична гледна точка транслокацията t(4:11) нарушава гена **KMT2A в 11q23**, като го слива с **AFF1 (AF4)** в 4q21, което води до химерен протеин, който аберантно регулира генната експресия, включително Hox гени, участващи в хематопоетичното развитие. Клетките RS4:11 са използвани и за изследване на вторични мутации, като тези в **FLT3**, които допринасят за левкемогенезата и резистентността към лечение. Клетъчната линия служи като надежден предклиничен модел за тестване на целеви терапии, включително инхибитори на взаимодействието KMT2A-AFF1 и агенти, насочени към свързаните сигнални пътища.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация