RS4:11

La línea celular RS4:11 procede de una paciente de 32 años con leucemia linfoblástica aguda (LLA) recidivante caracterizada por la translocación cromosómica t(4:11)(q21:q23). Esta translocación da lugar a la formación del gen de fusión **KMT2A-AFF1 (anteriormente MLL-AF4)**, que es un rasgo distintivo de este subtipo de leucemia. Las células RS4:11 presentan un perfil bifenotípico, coexpresando marcadores tanto de células B como monocíticos, lo que refleja las características de linaje mixto asociadas a este reordenamiento genético. Esta línea celular se utiliza ampliamente como modelo para comprender la biología de las leucemias con reordenamiento KMT2A, que se asocian con una enfermedad agresiva y un mal pronóstico.

Las células RS4:11 presentan características típicas de los linfoblastos pre-B, incluida la expresión de marcadores como CD19, HLA-DR y desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT), junto con genes de cadenas pesadas y ligeras de inmunoglobulina reordenados. Curiosamente, tras el tratamiento con agentes inductores de la diferenciación como los ésteres de forbol, las células RS4:11 adoptan un fenotipo similar al de los monocitos, lo que pone de manifiesto su plasticidad de linaje. Esta característica hace que la línea celular sea especialmente valiosa para el estudio de los factores moleculares que impulsan la diferenciación y el compromiso de linaje en la leucemia.

Genéticamente, la translocación t(4:11) altera el gen **KMT2A en 11q23**, fusionándolo con **AFF1 (AF4)** en 4q21, dando lugar a una proteína quimérica que regula de forma aberrante la expresión génica, incluidos los genes Hox implicados en el desarrollo hematopoyético. Las células RS4:11 también se han utilizado para estudiar mutaciones secundarias, como las de **FLT3**, que contribuyen a la leucemogénesis y a la resistencia al tratamiento. La línea celular sirve como modelo preclínico robusto para probar terapias dirigidas, incluyendo inhibidores de la interacción KMT2A-AFF1 y agentes dirigidos a las vías de señalización asociadas.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía