RS4:11

La lignée cellulaire RS4:11 provient d’une patiente de 32 ans atteinte d’une leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) en récidive, caractérisée par la translocation chromosomique t(4:11)(q21:q23). Cette translocation entraîne la formation du gène de fusion **KMT2A-AFF1 (anciennement MLL-AF4)**, qui est une caractéristique distinctive de ce sous-type de leucémie. Les cellules RS4:11 présentent un profil biphénotypique, co-exprimant à la fois des marqueurs des cellules B et des marqueurs monocytaires, ce qui reflète les caractéristiques de lignée mixte associées à ce réarrangement génétique. Cette lignée cellulaire est largement utilisée comme modèle pour comprendre la biologie des leucémies présentant un réarrangement du gène KMT2A, qui sont associées à une maladie agressive et à un mauvais pronostic.

Les cellules RS4:11 présentent des caractéristiques typiques des lymphoblastes pré-B, notamment l’expression de marqueurs tels que CD19, HLA-DR et la désoxynucléotidyltransférase terminale (TdT), ainsi que des gènes réarrangés des chaînes lourdes et légères d’immunoglobulines. Il est intéressant de noter que, suite à un traitement par des agents inducteurs de différenciation tels que les esters de phorbol, les cellules RS4:11 adoptent un phénotype de type monocytaire, ce qui met en évidence la plasticité de leur lignée. Cette caractéristique rend cette lignée cellulaire particulièrement précieuse pour l’étude des facteurs moléculaires responsables de la différenciation et de l’engagement de la lignée dans la leucémie.

Sur le plan génétique, la translocation t(4:11) perturbe le **gène KMT2A situé en 11q23**, en le fusionnant avec **AFF1 (AF4)** sur 4q21, ce qui donne lieu à une protéine chimérique qui régule de manière aberrante l’expression génique, y compris celle des gènes Hox impliqués dans le développement hématopoïétique. Les cellules RS4:11 ont également été utilisées pour étudier des mutations secondaires, telles que celles du gène **FLT3**, qui contribuent à la leucémogenèse et à la résistance au traitement. Cette lignée cellulaire constitue un modèle préclinique robuste pour tester des thérapies ciblées, notamment des inhibiteurs de l’interaction KMT2A-AFF1 et des agents ciblant les voies de signalisation associées.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.