RS4:11

Az RS4:11 sejtvonal egy 32 éves női betegből származik, akinek a t(4:11)(q21:q23) kromoszóma-transzlokációval jellemzett akut limfoblasztos leukémiája (ALL) relapszált. Ez a transzlokáció a **KMT2A-AFF1 (korábban MLL-AF4)** fúziós gén kialakulását eredményezi, amely ennek a leukémia altípusnak a jellemzője. Az RS4:11 sejtek bifenotípusos profilt mutatnak, B-sejtes és monocitás markereket egyaránt kifejeznek, ami tükrözi az e genetikai átrendeződéshez kapcsolódó vegyes vonalú jellegzetességeket. A sejtvonalat széles körben használják modellként a KMT2A átrendeződésű leukémiák biológiájának megértéséhez, amelyek agresszív betegséggel és rossz prognózissal járnak.

Az RS4:11 sejtek a pre-B limfoblasztokra jellemző tulajdonságokat mutatnak, beleértve az olyan markerek, mint a CD19, a HLA-DR és a terminális dezoxinukleotidiltranszferáz (TdT) expresszióját, valamint az átrendeződött immunglobulin nehéz- és könnyűlánc gének. Érdekes módon differenciálódást indukáló szerekkel, például forbolészterekkel való kezelés hatására az RS4:11 sejtek monocita-szerű fenotípust vesznek fel, ami kiemeli a sejtvonal-plaszticitásukat. Ez a tulajdonsága különösen értékessé teszi a sejtvonalat a leukémiában a differenciálódás és a vonalhoz kötődés molekuláris mozgatórugóinak tanulmányozására.

Genetikailag a t(4:11) transzlokáció megszakítja a 11q23-on** található **KMT2A gént, és összeolvad a 4q21-en található **AFF1 (AF4)** génnel, ami egy olyan kiméra fehérjét eredményez, amely rendellenesen szabályozza a génexpressziót, beleértve a vérképzőszervek fejlődésében szerepet játszó Hox géneket. Az RS4:11 sejteket másodlagos mutációk tanulmányozására is használták, például a **FLT3**-ban, amelyek hozzájárulnak a leukémogenezishez és a kezeléssel szembeni rezisztenciához. A sejtvonal robusztus preklinikai modellként szolgál a célzott terápiák tesztelésére, beleértve a KMT2A-AFF1 kölcsönhatás gátlóit és a kapcsolódó jelátviteli útvonalakat célzó szereket.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban