RS4:11

RS4:11-cellelinjen er avledet fra en 32 år gammel kvinnelig pasient med tilbakefall av akutt lymfoblastisk leukemi (ALL) som kjennetegnes av den kromosomale translokasjonen t(4:11)(q21:q23). Denne translokasjonen resulterer i dannelsen av fusjonsgenet **KMT2A-AFF1 (tidligere MLL-AF4)**, som er et kjennetegn ved denne leukemisubtypen. RS4:11-celler har en bifenotypisk profil, med samtidig uttrykk av både B-celle- og monocytmarkører, noe som gjenspeiler de blandede linjekarakteristikkene som er forbundet med denne genetiske rearrangementet. Cellelinjen er mye brukt som modell for å forstå biologien til KMT2A-rearrangert leukemi, som er forbundet med aggressiv sykdom og dårlig prognose.

RS4:11-celler viser typiske trekk for pre-B-lymfoblaster, inkludert uttrykk av markører som CD19, HLA-DR og terminal deoksynukleotidyltransferase (TdT), sammen med rearrangerte gener for tunge og lette immunglobulinkjeder. Det er interessant å merke seg at RS4:11-celler får en monocyttlignende fenotype ved behandling med differensieringsinduserende midler som f.eks. phorbolestere, noe som understreker cellelinjens plastisitet. Denne egenskapen gjør cellelinjen spesielt verdifull for studier av de molekylære drivkreftene bak differensiering og linjebinding ved leukemi.

Genetisk sett forstyrrer t(4:11)-translokasjonen **KMT2A-genet på 11q23** og fusjonerer det med **AFF1 (AF4)** på 4q21, noe som fører til et kimært protein som regulerer genuttrykket på en avvikende måte, blant annet Hox-gener som er involvert i hematopoietisk utvikling. RS4:11-celler har også blitt brukt til å studere sekundære mutasjoner, for eksempel i **FLT3**, som bidrar til leukemogenese og behandlingsresistens. Cellelinjen fungerer som en robust preklinisk modell for utprøving av målrettede terapier, inkludert hemmere av KMT2A-AFF1-interaksjonen og midler rettet mot assosierte signalveier.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring