RS4:11

Linia komórkowa RS4:11 pochodzi od 32-letniej pacjentki z nawrotową ostrą białaczką limfoblastyczną (ALL) charakteryzującą się translokacją chromosomalną t(4:11)(q21:q23). Translokacja ta skutkuje powstaniem genu fuzyjnego **KMT2A-AFF1 (dawniej MLL-AF4)**, który jest cechą charakterystyczną tego podtypu białaczki. Komórki RS4:11 wykazują profil bifenotypowy, współeksprymując zarówno markery komórek B, jak i monocytów, odzwierciedlając cechy linii mieszanej związane z tą rearanżacją genetyczną. Linia komórkowa jest szeroko stosowana jako model do zrozumienia biologii białaczek z rearanżacją KMT2A, które są związane z agresywną chorobą i złym rokowaniem.

Komórki RS4:11 wykazują cechy typowe dla limfoblastów pre-B, w tym ekspresję markerów takich jak CD19, HLA-DR i terminalna transferaza deoksynukleotydylowa (TdT), wraz z rearanżowanymi genami łańcuchów ciężkich i lekkich immunoglobulin. Co ciekawe, po poddaniu działaniu czynników indukujących różnicowanie, takich jak estry forbolu, komórki RS4:11 przyjmują fenotyp podobny do monocytów, podkreślając ich plastyczność linii. Ta cecha sprawia, że linia komórkowa jest szczególnie cenna do badania molekularnych czynników różnicowania i zaangażowania linii w białaczce.

Genetycznie, translokacja t(4:11) zaburza gen **KMT2A na 11q23**, łącząc go z **AFF1 (AF4)** na 4q21, prowadząc do powstania białka chimerycznego, które nieprawidłowo reguluje ekspresję genów, w tym genów Hox zaangażowanych w rozwój układu krwiotwórczego. Komórki RS4:11 zostały również wykorzystane do badania mutacji wtórnych, takich jak te w **FLT3**, które przyczyniają się do leukemogenezy i oporności na leczenie. Linia komórkowa służy jako solidny model przedkliniczny do testowania terapii celowanych, w tym inhibitorów interakcji KMT2A-AFF1 i środków ukierunkowanych na powiązane szlaki sygnałowe.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym