RS4:11

RS4:11-solulinja on peräisin 32-vuotiaalta naispotilaalta, jolla oli uusiutunut akuutti lymfoblastileukemia (ALL), jolle oli ominaista t(4:11)(q21:q23) kromosomitranslokaatio. Tämä translokaatio johtaa **KMT2A-AFF1 (aiemmin MLL-AF4)**-fuusiogeenin muodostumiseen, joka on tämän leukemian alatyypin tunnusmerkki. RS4:11-soluilla on bifenotyyppinen profiili, jossa ne ilmentävät sekä B-solujen että monosyyttien merkkiaineita, mikä kuvastaa tähän geneettiseen uudelleenjärjestäytymiseen liittyviä sekalinjaisia ominaisuuksia. Tätä solulinjaa käytetään laajalti mallina KMT2A-rejärjestäytyneiden leukemioiden biologian ymmärtämisessä, sillä näihin leukemioihin liittyy aggressiivinen tauti ja huono ennuste.

RS4:11-soluilla on pre-B-lymfoblasteille tyypillisiä piirteitä, kuten CD19:n, HLA-DR:n ja terminaalisen deoksinukleotidyylitransferaasin (TdT) kaltaisten markkereiden ilmentyminen sekä uudelleenjärjestäytyneet immunoglobuliinin raskaan ja kevyen ketjun geenit. Mielenkiintoista on, että kun RS4:11-soluja käsitellään erilaistumista indusoivilla aineilla, kuten forboliestereillä, ne omaksuvat monosyyttien kaltaisen fenotyypin, mikä korostaa niiden linjaston plastisuutta. Tämä ominaisuus tekee solulinjasta erityisen arvokkaan leukemian erilaistumisen ja linjasitoutumisen molekyylitekijöiden tutkimisessa.

Geneettisesti t(4:11)-translokaatio häiritsee **KMT2A-geeniä 11q23:ssa** ja sulauttaa sen **AFF1:n (AF4)** kanssa 4q21:ssä, mikä johtaa kimeeriseen proteiiniin, joka säätelee poikkeavasti geenien ilmentymistä, mukaan lukien Hox-geenit, jotka osallistuvat hematopoieettiseen kehitykseen. RS4:11-soluja on käytetty myös tutkimaan sekundaarisia mutaatioita, kuten **FLT3**:n mutaatioita, jotka vaikuttavat leukemogeneesiin ja hoitoresistenssiin. Solulinja toimii vankkana prekliinisenä mallina kohdennettujen hoitojen testaamiseen, mukaan lukien KMT2A-AFF1-vuorovaikutuksen estäjät ja siihen liittyviin signaalireitteihin kohdistuvat aineet.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa