Langsung ke isi
B-LCL-CDG1
Tisu
Darah tepi
Penyakit
Gangguan Bawaan Glikosilasi
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (B-LCL yang mengalami transformasi akibat EBV; non-metastatik)

Dokumen

B-LCL-CDG1

Cell line · Nomor produk 302012

B-LCL-CDG1 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient diagnosed with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG). This...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi

B-LCL-CDG1 adalah garis sel limfosit B yang ditransformasi EBV yang berasal dari pasien yang didiagnosis dengan PMM2-CDG, kelainan glikosilasi bawaan (CDG). Gangguan metabolisme yang langka ini muncul akibat mutasi pada gen *PMM2*, yang mengkode fosfomannomutase 2 (PMM2), enzim penting dalam jalur glikosilasi. Mutasi pada *PMM2* mengganggu sintesis rantai oligosakarida terglikosilasi, yang menyebabkan glikosilasi yang rusak pada berbagai glikoprotein dan glikosfingolipid dalam jaringan dan darah. Kelainan ini ditandai dengan manifestasi multisistemik, yang sering kali memengaruhi fungsi neurologis, hati, dan endokrin.

Sebagai garis sel limfoblastoid yang ditransformasi EBV, B-LCL-CDG1 menyediakan model in vitro yang berharga untuk mempelajari konsekuensi molekuler dan seluler dari defisiensi * PMM2 *. Garis sel ini dapat digunakan untuk menyelidiki cacat glikosilasi, aktivitas enzim PMM2, dan intervensi terapeutik potensial, termasuk koreksi gen dan suplementasi substrat. B-LCL-CDG1, bersama dengan garis sel turunan pasien CDG lainnya, berfungsi sebagai sumber daya penting untuk memahami patofisiologi CDG dan mengevaluasi strategi pengobatan baru untuk gangguan ini.

Tisu
Darah tepi
Penyakit
Gangguan Bawaan Glikosilasi
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (B-LCL yang mengalami transformasi akibat EBV; non-metastatik)
Aplikasi
Genotipe efek CDG pada sel imun. Pengujian fungsional (misalnya antigen permukaan sel B). Pengujian obat sitotoksik. Analisis mutasi. Analisis mekanisme apoptosis. Pengetikan HLA. Dampak glikosilasi yang rusak dari glikoprotein seluler yang berbeda pada beragam fungsi.

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Penangguhan
Status GMO
GMO-S2
Rincian status GMO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
2

03Karakteristik

Morfologi
Sel bulat
Jenis sel
Limfosit B

04Pengidentifikasi

Referensi
B-LCL-CDG1 (Nomor katalog Cytion 302012)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Ekspresi dan kerentanan

Virus
Transformant: EBV

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS yang dinonaktifkan dengan panas
Perbanyakan sel
Pertahankan kultur dengan secara berkala menambahkan atau mengganti medium. Mulailah kultur dengan kepadatan 2 x 10⁵ sel/ml dan jaga konsentrasi sel dalam rentang 1 x 10⁵ hingga 5 x 10⁵ sel/ml untuk pertumbuhan optimal.
Pergantian cairan
Setelah warna medium berubah menjadi kuning
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Etnis
Kaukasia