B-LCL-CDG1

B-LCL-CDG1 ir ar EBV transformēta B limfocītu šūnu līnija, kas iegūta no pacienta, kuram diagnosticēts PMM2-CDG - iedzimts glikozilēšanas traucējums (CDG). Šo reto vielmaiņas traucējumu izraisa mutācijas *PMM2* gēnā, kas kodē fosfomanomutāzi 2 (PMM2), būtisku fermentu glikozilēšanas ceļā. Mutācijas *PMM2* traucē glikozilētu oligosaharīdu ķēžu sintēzi, izraisot dažādu glikoproteīnu un glikofingolipīdu glikozilēšanas traucējumus audos un asinīs. Slimībai ir raksturīgas multisistēmiskas izpausmes, kas bieži ietekmē neiroloģiskās, aknu un endokrīnās funkcijas.

B-LCL-CDG1 kā EBV transformēta limfoblastoīdu šūnu līnija ir vērtīgs in vitro modelis *PMM2* deficīta molekulāro un šūnu seku izpētei. Šo šūnu līniju var izmantot, lai pētītu glikozilēšanas defektus, PMM2 enzīma aktivitāti un iespējamās terapeitiskās iejaukšanās, tostarp gēnu korekciju un substrāta papildināšanu. B-LCL-CDG1 līdzās citām no CDG pacientiem iegūtām šūnu līnijām kalpo kā būtisks resurss, lai izprastu CDG patofizioloģiju un novērtētu jaunas šo traucējumu ārstēšanas stratēģijas.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu